造血干细胞流式检测结果分析

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回复 nailute1985 的帖子6 x- [! l  _8 J5 Q* H

/ Y6 N4 @) I$ D) w, _8 i: o1.CD34的门？不是从FSC/SSC散点图画门后检测3个补偿管（3个抗体）进行调补偿吗？+ i, E- H- _; k$ p1 M% \
2.然后这个画门的位置在哪里呢？

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. ]6 f4 a2 V: `, ^. t& D

nailute1985

回复 SKC-SFC 的帖子/ y2 s$ J6 z; p
$ s6 L9 Z; D( L
1、我的意思是在你做同型对照或者cd34+检测之前就得用阴性对照把补偿什么的调好了，然后你的isotype跟你的cd34+用的是同一个protocol 就不需要单独调了
+ x, O5 x( p7 o) a2、看你设的这些门没有啥大问题啊 你是哪个门不确定？
5 P$ O  X4 B/ G6 M

nailute1985

最后cd34+ 0.8%正常啊

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2 W7 Q% z; ~9 P7 c都用同型对照了，还有什么阴性对照呢？难不成还得用细胞做阴性对照，不是多此一举吗？

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回复 nailute1985 的帖子& P! R7 s6 x, w# T

3 ~( w- s5 a% b) |6 K" h我们是用调整过的R4（在FSC/SSC的散点图中，显示R5，把R4的图复制过来后，把门的左侧划到200位置）作为最终的结果，大概0.2%左右。

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9 A7 F2 n3 C4 S7 W
大部分门的设置没有太大的问题，有两处有疑惑，第一个在调补偿的时候，同型对照也就是阴性对照的管的划门位置（R1）怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里？

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: ~7 Z- W+ I, x( ~
) I& e: P7 J( v% Z) U0 K我们此次是检测CD34+CD45+CD133，所以我们按三色的检测标准。
1 F2 W  Z# Q, n1 ^1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞
# B9 B# @8 ]; c/ {; E* P2.FITC+PerCP+APC的补偿管，共3管
* ?& @. D2 [( i' V) U0 h& a8 l. L3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体9 [4 T9 l$ k2 ]; G7 o- r8 Z: _* A2 v  V2 }
共5管

nailute1985

回复 SKC-SFC 的帖子0 R; `7 E  @1 R+ _" |+ Q
+ `4 i# A% y* w1 ~7 X/ {( n
晕 阴性对照不是让你调补偿的么，同型对照不是做实验的isotype么