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楼主: SKC-SFC
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造血干细胞流式检测结果分析     [复制链接]

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发表于 2015-7-4 08:23 |只看该作者
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& I/ ?2 f: f; M& t8 S3 e1 \' Q# C8 c7 o9 R
1.CD34的门?不是从FSC/SSC散点图画门后检测3个补偿管(3个抗体)进行调补偿吗?. {$ L! |8 [' O
2.然后这个画门的位置在哪里呢?
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发表于 2015-7-4 08:39 |只看该作者
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发表于 2015-7-4 08:42 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子# g7 Q" R" U/ z$ t4 c4 @9 e

% V. p4 T, f! z7 R/ ~
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发表于 2015-7-4 10:25 |只看该作者
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回复 SKC-SFC 的帖子6 u; P8 H, a" g; {( g& l1 v9 d
6 t: H4 P: T' c  y1 {
1、我的意思是在你做同型对照或者cd34+检测之前就得用阴性对照把补偿什么的调好了,然后你的isotype跟你的cd34+用的是同一个protocol 就不需要单独调了
0 [- e6 H  x1 P" m5 ~2、看你设的这些门没有啥大问题啊 你是哪个门不确定?# K4 P5 Y5 ]; K2 z+ _1 U, {3 d
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发表于 2015-7-4 10:27 |只看该作者
最后cd34+ 0.8%正常啊
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发表于 2015-7-5 09:26 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子6 r7 z! I; v; J, h+ q
% h! D8 _- b8 f/ ]$ B& {& _( d
都用同型对照了,还有什么阴性对照呢?难不成还得用细胞做阴性对照,不是多此一举吗?
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发表于 2015-7-5 09:29 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子
3 k/ ?2 U$ I9 e. b* V" {7 L1 ~5 H! p+ k- C% N
我们是用调整过的R4(在FSC/SSC的散点图中,显示R5,把R4的图复制过来后,把门的左侧划到200位置)作为最终的结果,大概0.2%左右。
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发表于 2015-7-5 09:32 |只看该作者
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* v4 y4 G; V/ ~
2 {- t8 N0 `9 J- k4 ]8 [- l, s大部分门的设置没有太大的问题,有两处有疑惑,第一个在调补偿的时候,同型对照也就是阴性对照的管的划门位置(R1)怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里?

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发表于 2015-7-5 09:34 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子7 y6 R6 B6 Z, v6 y

1 F6 M. [7 G4 r/ t4 b我们此次是检测CD34+CD45+CD133,所以我们按三色的检测标准。
8 m5 g0 v7 q& r; i) S; M- Z1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞5 K  Y% t( }) J9 P5 I+ z
2.FITC+PerCP+APC的补偿管,共3管$ q" }+ ?# L9 z+ `
3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体
$ ]( o5 S  Q. i7 l; g+ u共5管
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发表于 2015-7-5 12:20 |只看该作者
回复 SKC-SFC 的帖子( M2 f$ S0 t$ t. V

1 ~  ]4 Y$ }5 ]; i. g6 Z晕 阴性对照不是让你调补偿的么,同型对照不是做实验的isotype么
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