培养脐带干细胞没有成功，恳请各位老师指教，谢谢您！！

cloud100

回复 yongganyixie 的帖子) g6 q* J* I; R: d+ e+ F
% M" K) z! r* i  m3 p6 e
嗯， 第一次换液是第6天，后面看培养液变金黄色换，大概4-5天的样子，应该不是粘稠的。比较清亮。

lovesxj941

回复 cloud100 的帖子8 P2 W8 F: H; H( F/ P
9 \5 n: |# i2 o8 ?& V# x
恩，酶消化法更好，必须的。

yinff1988

现在大家都用F12吗？不用DMEM/低糖吗？

cloud100

回复 yinff1988 的帖子
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+ N$ P9 W9 j$ D/ U& S我还没有成功，你懂的。不过无论是文献还是论坛里的经验，有人用DMEM/LG成功的，应该影响不大。

baby00000003

时间还早，耐心等~

李敏拉

培养几天后换液时发现有粘稠液体，换液时把它吸走了，然后换上新鲜的培养液，这样可以吗？那粘稠的液体：好像是组织边缘融化于培养基中，也就不可能会贴壁，: c4 C  q' ]$ E+ z
吸掉可以吗？
% A. ?0 X: m  t

fengtingyong

操作应该没有多大问题，你在接种时你的组织块应该加少许的培养液润一润组织块之后倒置，隔夜换液，应该会爬出来了，以后看涨势添加培养液。希望你能成功！

cloud100

回复 fengtingyong 的帖子/ _+ z5 o7 E' ]) h% s5 l
/ F: R6 f: U2 a. b, j" b' s
哈哈，谢谢呀！后面我成功了，发现关键之一是，要让组织块尽早接触培养基。

cloud100

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& C2 X6 T- [- q* l, t" {& f  {' E) G% U, ~; s5 y$ g
呵呵。我后来成功了。
) K  S2 U8 y3 Y- \我认为最关键的是，一定要最新鲜的脐带组织。要生下来就立马运输动手实验，越快越好。然后取了华通胶，剪碎，直接放到培养皿上面，超净台里面风机吹2-3分钟，把组织块周围水吹干了，然后立马小心滴加培养液，刚刚保持组织块湿润就OK。
& n; \& S3 f# w4 I: B/ }* J5 j. b过24小时小心滴加培养液，浸没培养液，然后就千万别动它了。
. R4 i7 W# D/ d, K# R" y! X隔着培养箱的玻璃门观察，直到培养液颜色变金黄了，可以半量换液。反正前两周，千万别没事去动它，除非要换液。就这样等到它长出来。