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楼主: cloud100
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培养脐带干细胞没有成功,恳请各位老师指教,谢谢您!!   [复制链接]

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发表于 2014-7-28 14:16 |只看该作者
给楼主个建议,确认脐带没污染的前提下,尽量不要用抗生素,对于脐带这种急需贴壁和爬出细胞的情况来说,抗生素是会让细胞爬出减慢甚至不生长的
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发表于 2014-7-29 00:43 |只看该作者
回复 snowny007 的帖子
# `# Z' X$ w/ ]; q
0 X$ ^! b5 @( X( `6 G啊,这样啊。。。好吧,我试试不用抗生素。谢谢啦~~

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发表于 2014-7-29 19:10 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
, l3 [* z/ F0 l9 o/ }% I& j' @8 a8 t  T1 G% H3 K3 D1 \% H
哦,即使是专用的FBS, 也是需要筛选才行的,这样培养效果会比较好,如果普通的可能就是生长会比较缓慢,传代时间间隔长,养干细胞确实蛮费钱的呀
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发表于 2014-7-29 23:09 |只看该作者
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回复 cyagen 的帖子% o. ^; d/ M5 y* r' t$ J
' |9 _$ \4 _$ b0 P4 [' D3 \. s! f
嗯,后来才知道这个道理。之前,看文献,大家也大多用的Gibco的FBS,也就买了。。一直不成功,根本没有细胞长出来。! l& B! m  [! [: K' y. D) V0 K
组织块,有人说小点好,1立方厘米,有人说大点好,我两种都试了,都不成功,考虑是不是要加一点马血清和细胞营养因子...
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发表于 2014-7-29 23:12 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子- S, G6 e3 d  n1 K/ Y7 P

2 W! x+ ]; H& e& a5 P* O! f5 `我还想问下你哦,关于脐带干细胞组织块的大小,,有人说尽量剪碎,小点好;也有人大块的也成功了,我都糊涂了,不知道到底要多大才合适?芝麻大小、米粒大小?

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发表于 2014-7-30 13:38 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
: N+ s9 a. @8 u# o- ^& m- O' T7 Y7 `' S; `5 v( i% |8 q$ k
个人感觉还是剪碎些吧,倒不用剪成芝麻大小,米粒大小就行,大块的组织块也是可以爬出细胞的,个人感觉就是慢一些,再就是选取的位置,尽量撕取华通胶部位,更好培养。其实你多做几次有经验了就知道取什么位置、剪多大块还有什么时候爬出细胞了。。。希望可以帮到你
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发表于 2014-7-30 19:46 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子
' L& ]1 A' [6 w9 a
! Z% |; g# m! [! V嗯,好的,谢谢您。我撕的是羊膜和血管之间的大块组织,应该是华通胶吧。。。

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发表于 2014-7-31 08:53 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子9 q  T2 |" [" c; W
2 m- P. `3 T" R! h$ K, A/ k! @
嗯,是的,我们也是使用该部分。
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发表于 2014-8-3 21:47 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
3 D1 \3 X, U3 w0 q7 ], Y6 g  O3 p. j  H3 c* P1 ~& a
文献上面不会写明具体用的是哪种血清的,血清批次之间也会有差异,如果有条件还是筛选一下,我们都是剪碎的。
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发表于 2014-8-8 10:38 |只看该作者
回复 frankhu 的帖子% X2 `- c$ }( C5 n; r6 q

" f4 {  T5 b; o( t! ^同意楼上的,剪成米粒大小,加少量培养液,但我们是第二天补液
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