不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
, p3 w% F3 T# }! h) W
% c3 E( ^0 e1 {基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1, ]" ]  U0 L) N: v  ]5 N5 }
TOP10菌株/ x/ l" d4 w( k0 b* g
7 K; Y+ ]$ _" }$ \" W: u4 d5 Z% `
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
+ |; ]$ k" ?0 S5 t/ T3 N0 }' }% \, Y5 j# L$ ^
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG' U  i3 `' e. i  L
可以看看别人博客里写的
. z% U+ T, a/ f  R4 S1 i8 zhttp://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。
8 t' d7 l8 I' L7 G8 _TOP10转化效率低很多，不怎么好用。- Y' r, b2 a: ^# g/ C4 R7 N
Stbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a& m% W' x  ^" C
效率是反过来的

石山巨石

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6 k3 P1 c2 b5 A3 e
- B" y" J5 p, O/ F: {2 U0 `请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

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+ U2 r' Q) ?6 M9 p9 B$ S, j; S2 {
多谢哈

zm19900508

回复 石山巨石 的帖子7 o" r; ]% E/ |" o
* X; J- F5 B$ X1 i7 d
谢啦

zm19900508

回复 weiyepan 的帖子% U! k8 L: H1 Q9 Q$ O

+ w7 v4 u/ i- i4 N: Q我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。& l9 i/ _0 I4 l; q  ~: k! C9 N
DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。9 N* P% p5 `$ g! u* X, m
使用建议DH5a

weiyepan

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  ~- K5 F" e  o& t" u+ K6 o' M
3 ^7 \( J/ H: fshRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？