CIK加液后产生絮状物，大家来分析一下原因！！！

sunny.yc

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+ D$ a3 x! v/ v- M1 l5 s. d/ z, E9 d* l- L) O7 Z. J
你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子" ^4 i% l) L. ]# u) |* s

2 m2 k; I. ]: o记错了，IFN-r应该是1000U/ml。现在纠结的问题就是到底可不可以D0天三种细胞因子同时加？与传统工艺效果哪个更好一些。。。

sunny.yc

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& Q9 V8 T* J) m% p, K( t+ X% r0 V2 {+ g& J# u& j( F; T+ d
建议还是分开加，挺多文献都有这样的描述，而且理论看起来都很合理的# Y' h3 A7 _& C6 |; I8 [: S4 h# L

. g7 f4 D2 ~9 y2 g! j' ^$ Z3 j" d0 Y如果你还是在纠结的话，建议你连续做几个平行实验看看，可能对于你的培养体系来说，D0加一种或加三种影响不大呢

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子) ?6 p, T' a( \1 S! N
7 ^* r2 C9 E# U+ |5 H
最近看文献看到有这么做的，D0天添加IFN-r和anti-CD3 mAb,第二天添加IL-2，后续培养以IFN-r和IL-2维持，按文献所说扩增倍数还挺高的~

sunny.yc

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9 }1 t+ ~& R( u3 `& ^. Y2 H7 P
8 |# |' b/ |: l! ]+ h& c" a0 ^8 \' U可能我了解得还太少，持续加干扰素还是第一次听到，试试看吧！

jenvy121

回复 lyj-0017 的帖子9 w% ~1 N) W- A- N) n% W
- z0 V, L5 X2 T
不知你们的培养体系有多大？一般用多少预热多少，而且预热的时间也不长，不会出现很大的酸碱失衡吧

lyj-0017

回复 jenvy121 的帖子8 ]3 ?4 r' G3 Z) D& m. o& ?8 p

5 @# y. i0 c* n培养体系得看分离得到的单个核细胞数量，根据5~10X10^5/ml的细胞密度铺袋。你后面说的预热多少没看懂，应该是问预热多少培养基吧？一般预热一瓶培养基，培养基手感不那么凉即可添加。酸碱失衡我觉得不可避免，但是不会出现太大失衡~

jenvy121

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0 @8 {, h$ u# x' @; B6 L
5 Y7 q. ^" F# D3 O- H' K) y对的，我们每次换液计算好用的培养基的量，然后预热

lyj-0017

回复 jenvy121 的帖子5 U! D& \5 b* Z: E0 x
1 M: K; Z( p7 B0 m- k
你们用的是机采吗？还是直接采外周血？现在培养一次最多能获得多少细胞呢？

jenvy121

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1 J  M) A4 e" e2 }
- q, \: r/ P3 N/ e- T直接采外周血，数量也是因人而异吧