请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。5 F7 a; e) n8 w
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。; c# |- j) k+ t1 q$ W/ V0 c
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。6 O5 h( a  R/ j$ c% L, l4 N
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。# h. S- G$ M! X4 f% N8 B1 e8 J6 Z
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，* E/ t5 u" m% V
之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。0 j# ~& w2 Y# Y
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
* K0 F# p  R5 f; ~7 d* j恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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2 j9 s5 Z& j7 z  m
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

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% Y5 L* r& E- s9 I- N5 l% [& q
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

回复 bloodroses 的帖子2 x1 K1 H& c+ g$ D

2 B8 N7 Z7 D% O/ j6 Z2 [6 E和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子4 n, k1 Q5 N$ A4 J' Q
6 \- i  f  ^5 x, d1 ]- V
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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( C/ X/ a; [- _! a" M
; w0 u2 S+ E. i2 M我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45 0 w. a5 R- [9 K& N$ w' z8 p
小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。* }; D9 _6 w5 e7 K
诱导 ...

; s, b, _* i: a4 o4 \, M) N7 p5 ~2 B
双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

回复 lyd20042004 的帖子" u9 H- I0 s1 C0 k! _

" W8 M8 J5 R5 q- ~8 t" I5 X' T目前的数据只是个例
8 K. ]5 n" [$ P* Q# N数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说