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楼主: bloodroses
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请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3,CD56双阳性的问题   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2013-1-21 12:44 |只看该作者
回复 bloodroses 的帖子. [: j; w4 f0 n9 u9 |$ L( Q

+ |' v4 w  X% {5 _/ H你在养外周血的时候,也加入FBS了吗?应该是自体血浆吧6 J$ e2 h* n! V9 `$ R' \

8 f' z2 W* o& u9 b- v1 u你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种# \4 q$ t3 a( P9 J+ r8 i) l

, B& ^( ]: g2 @$ H& Q: r因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的
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发表于 2013-1-21 16:18 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子
+ {: y) V- A: N/ c- b- E% U3 V! u3 [$ q9 ]5 }  a. R& h$ C4 W2 k! P8 N
养外周血的时候,是用的国产无血清培养基,没有加血浆或者血清。
7 ]) u  w9 U# K8 g; y( _养脐血的时候,不加血清,只加10%FBS,或者只加10%自体血浆,都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。
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发表于 2013-1-21 16:23 |只看该作者
做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血,少部分脐带血,个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了,你的外周血是正常人的吧?个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大
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发表于 2013-1-21 16:36 |只看该作者
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回复 kiss2346 的帖子
9 O1 j5 T+ d: G) i/ C. r0 u7 R/ N5 n$ i
外周血是正常人的血,没有炎症也没有癌症。
7 X! q1 B% x; X' c5 T& m请问你用的脐血,采血量是多少啊,血袋是多大容量的,抗凝剂是的成分和量是多少啊?
+ W  L, L0 R3 t9 j3 Z; j; T谢谢。
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发表于 2013-1-21 17:02 |只看该作者
回复 bloodroses 的帖子
* f: ?" v  A4 W# s/ ^3 C. @
5 g. o  W$ C% I4 H7 G7 [一般脐血采血量在100左右,分离单个核大概在1.5*10~8左右 ,血袋容量是200的,抗凝剂是肝素钠
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发表于 2013-1-22 08:53 |只看该作者
我想请教下,培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2,还要不要添加了IL-1和CD3?
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发表于 2013-1-22 09:14 |只看该作者
bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45 % L# j2 n  q$ g) M
小弟刚刚接触CIK,养外周血CIK时,增殖团的数量和体积都相应增加,第7天双阳率是10%,第14天到了50%。/ Q6 w& M1 B' O% I* m& O
诱导 ...

6 g; e) _% D$ t  a楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊?一般在室温放了多久才开始分离的?
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发表于 2013-1-22 09:38 |只看该作者
回复 kiss2346 的帖子+ ?) K( x! ?$ r7 F( _& {
" B' e; O; q# \( b
非常感谢您的回复。

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发表于 2013-1-22 09:38 |只看该作者
回复 gejianyun 的帖子) [4 Z8 h# w. Q
; o; T+ ?4 e3 w4 O
换液的时候,我只加了IL-2
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发表于 2013-1-22 09:40 |只看该作者
回复 wind789 的帖子0 e& d( B; y0 }5 J" A
  e  t  q9 N3 ?! Q
用的是200ml血袋,抗凝剂是枸橼酸钠,采血量大概60~80ml(含28ml抗凝剂),一般室温放置30~60min后开始离心。
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