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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-11 11:08 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子
: V9 a6 {1 ?! }6 @# e
+ ]5 e" P$ V6 d9 b7 {9 L应该不是细胞代次问题。你说第一天贴壁很好,有图片吗?
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藤椅
发表于 2012-9-11 13:36 |只看该作者
无图无真相,最好传几张照片看看哦:)

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-9-11 21:53 |只看该作者
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hiPS细胞复苏很不容易,第一天看上去有克隆,其实肯定活性不是很好了,复苏过程中要加ROCK inhibitor,这个很重要!
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报纸
发表于 2012-9-12 07:51 |只看该作者
回复 小禾禾 的帖子6 ^) h. {' z( M0 w' U/ Y: t0 i

/ [+ c  \; k! k. y' A% C( x% _

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地板
发表于 2012-9-12 08:07 |只看该作者
回复 frankieisme 的帖子) `. R# G5 _" V
* Y* K. \. z$ Z" Q
我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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小小研究员

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发表于 2012-9-12 08:13 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子* c" e8 W; h- B* I4 X
& [, k, W& C8 n2 p. M
回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb 可以使用qq截图

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发表于 2012-9-12 08:18 |只看该作者
回复 细胞-77 的帖子9 H/ o2 J% R: ]" ?

, s/ X/ W$ V5 M0 t我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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发表于 2012-9-12 08:53 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子3 ~4 I) F6 s; j# x2 Y( I! |% G0 ^
9 G8 ?3 b1 p7 d& `/ n* |6 q

9 s  x& w1 D. T' ]! |# b4 N1 ?  y& W4 t) Z4 Q4 _; @
补充内容 (2012-9-12 08:54):
! g! ]* |6 R1 G, k5 j& \这是复苏后24h的照片
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发表于 2012-9-12 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子' l3 @7 l  m: Q% B# M" E9 P

' c1 P* e2 f( B% @, f: l' |; P谢谢指点!
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