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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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发表于 2012-4-20 19:07 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20
; D8 Q, ^& x8 K% i( X9 K哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例
' u  a& Z& i! J! f* R1 m
确实要知道也不用实时定量这么麻烦,太敏感了还容易放大误差。" A! S0 m! A) k# B# f9 a; J4 H& r
7 `  X% i  @) @5 L
如果有现成的混合物,买回来,跑块胶,大概就知道了。
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发表于 2012-4-21 00:52 |只看该作者
sj03572001 发表于 2012-3-31 11:32
& J) U* \5 Q& g3 wVSVG作为膜蛋白,表达量过高对细胞毒性,回造成细胞死亡,如果按1:1:1的比例应该不是最佳的,nature protoc ...
0 d( g- L$ |$ z
这篇文章的质粒用量好大啊。

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发表于 2012-4-21 00:53 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20 0 M% {: ?8 v6 X: k0 z9 }8 N6 P
哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

9 q* w* g) A! v$ l7 r要知道也不用实时定量的,太敏感又缺乏内参,误差的放大无可估计的。/ ?! c( _/ U. v- c- L
6 A  U, W( M5 x( X! j/ m+ h3 j
直接跑个胶就大概知道了,关键是没有这个混合物。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-4-24 11:43 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 hetven 的帖子' r4 n. l) d4 s" f
: Z( A& L9 q- ~- F! S
买一套罢,然后破解了就拿出去卖

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发表于 2012-4-24 17:42 |只看该作者
回复 hetven 的帖子0 `" o, E$ T5 h! y/ K& w, m
- p$ B  p+ e# a9 M
不大了,他那时12X15dish的量 ,我们10X10 用的是 100 100 20 50
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发表于 2012-5-31 23:26 |只看该作者
O(∩_∩)O谢谢

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发表于 2012-6-1 14:18 |只看该作者
按比例大约为1:1:1试试,就是说目的基因跟包装载体按5:4试试(5:5:4),你可以试试,膜蛋白毒性很大,多了不好,所以适当降低其比例是可以的
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发表于 2012-6-29 10:19 |只看该作者
有谁做个比例优化啊

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小小研究员

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发表于 2012-7-1 15:25 |只看该作者
回复 biosenselot 的帖子. ]! v0 B' Q9 h4 g" p% x& z
% k0 E" ]& i2 D* [- b9 i6 A1 E
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发表于 2012-7-9 10:43 |只看该作者
正准备用这套病毒!!好东西!
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