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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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包包
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发表于 2013-7-23 22:37 |只看该作者
这几个比例每个公司都有自己的体系,体系一般固定不变,但这几种质粒在大提时想得到高质量的质粒有些困难,Mage、MN的试剂盒都试过,也不是很理想。每一批次的质粒质量直接影响每一批次慢病毒包装试剂盒的质量,必要的时候根据定量PCR的数据效果,会尝试稍微改变体系,这是一件很费时费力的事。
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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 Dancmacabre 的帖子; _  x2 ]# A$ ?* F" g
) J2 Z- `6 Y0 Q2 F4 d* w
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样8 D6 X" f0 Y9 Y
( i  s2 o$ |; H# r# _+ z( A
否则他会看不到
# a0 ?/ q/ I9 z4 s: k/ g0 M0 s* x

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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 翱翔的鱼 的帖子
9 u4 X- P8 Z7 ^& K8 o" ^6 u: E& T# o1 Z  t
看31楼

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发表于 2013-11-7 13:00 |只看该作者
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这套系统我也在用,在包pCDH miRNA时,效果很不错,浓缩后滴度可达8次方。  k# r# e6 V7 m2 N4 {7 {
但是包装pLVX时效果则很差,不知道是不是兼容性不够好。
: S: ^$ M! c' K! T我觉得pLP2的量不能太少吧?因为Rev不仅要带入核,还要允许pLP1上gagpol表达,个人觉得5:6:5:4是不是比较合适~
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发表于 2013-11-19 16:31 |只看该作者
回复 sj03572001 的帖子: M/ t$ V, |- ]! y' x$ J  F  ~

" ~+ C3 t( F- @$ |' r% F2 Q一点问题,
: a' z( Z" n8 X. x- V* @5 o- m, q06NP里的质粒质量比例 transfer:pMDL(gagpol):pRev(rev):pVSVG= 270:176:68:95
7 c7 `7 x8 y9 Y5 l8 W* ~: Z- l% c& ~
  E+ J/ W) E" o: Y2 j如果考虑各质粒的大小改为mol比的话,我算了一下大概是=34:20:16:16/ ^$ V. L" r; g5 u
也就是说,表达质粒与包装质粒的mol比例为=34:52 约等于 2:3' t9 K4 I/ e8 [: D9 }7 x6 H9 ?
* e/ t0 n4 A; V+ }" _2 N  I
我一直困惑所谓的比例是应该按质量还是mol计算。+ N; B. Q  w. g7 P

3 r8 x8 D% }3 B7 r) N- g还请高手们解惑,=)拜谢了~
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发表于 2013-11-19 20:43 |只看该作者
还有一套包装系统PSPAX2+PMP2G跟这个包装质粒系统有什么差异
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小小研究员

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发表于 2013-11-20 08:07 |只看该作者
回复 shermin 的帖子
- b6 T2 l: O3 _  y. P  k6 L, w2 o7 M; w# n2 `
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发表于 2013-12-7 21:21 |只看该作者
1:1:1:1出来的效果不是很好啊
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发表于 2013-12-26 11:28 |只看该作者
我也想知道哪种比例效果最佳,求高手指教

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小小研究员

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发表于 2013-12-30 01:19 |只看该作者
回复 zje6265610 的帖子+ Q5 {. P" r5 G" _) N9 [6 Q
5 I4 r% j3 E) h4 S4 z, V
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