关于间充质干细胞培养的一点经验

阳光无畏

回复 金戈 的帖子' N! |* H& \  g, V0 Y
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09年伊朗人在《Nature Protocol》上一篇文章认为，通过frequent medium changes 及缩短胰蛋白酶消化时间便可，没有提及离心，整个过程都不离心，我也很好奇，到底是不是非离心不可？离心的利弊如何权衡？

weijunning

回复 2420527 的帖子
2 ~8 X! c8 ^9 G( q: i* c, n6 [: S
冒昧地问一句 你们的无血清培养基是什么牌子的？

lql2006wh0

回复 dwl1209 的帖子9 U4 N; n/ a0 v& f/ B0 j" v/ \( T
$ E7 |, O% x; z1 ?' M
bFGF浓度不同，作用不同，这里是用来促进细胞分裂生长的。
* n1 `5 d& n' a! p& G0 hlz是想把杂细胞去掉重复使用培养瓶的吧。

xiongwangyj

% e  g8 F( z( y1 u: n
5 W) ?, G0 h3 p/ ^4 @
胰酶不清除肯定会影响细胞生长的。楼主第二次再消化吸掉细胞是因为还要继续使用那个培养瓶吗？

xiongwangyj

回复 yang179 的帖子
7 `# k' h7 f. D& M2 I1 u) `) _. X2 b; ]6 V8 U" A
这样吹打不会对细胞有损伤吗？那你们一般是消化多久呢？

309208770

回复 yang179 的帖子
" ?" a; {6 R- l" r, h: m5 u9 o' R' h4 t  u5 l
消化的差不多时，细胞已经成单细胞从瓶壁上脱落，此时还怎么将大部分胰酶去掉？？那不把细胞也丢掉了吗？

309208770

回复 yanmin 的帖子
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细胞融合度太高了吧，太高的话消化时细胞就不容易呈单细胞脱落，镜下观察是成片脱落，这样的细胞团传代后是不容易贴壁的

309208770

回复 zhang0194 的帖子
4 G: X" e+ z; A# Q* r3 I2 ?( ?/ r
我用的也是这个方法，

huanr006

学习中

zhang0194

回复 sdwzg119 的帖子
3 [8 @" Z: C" a0 q* j. z% m* r+ v$ J) c- [- f% o% z' W# T- K
我们做过小实验，E 的存在对细胞的生长影响极大，建议离心去E，传代按瓶子来说的话究竟是1：4.