关于间充质干细胞培养的一点经验

azzyou

对啊，第一次消化不下来的都不要了，很大一部分不是间充质啊。而且有一个小窍门，原代制作的时候，好像是3-4天早贴壁的是间充质，上皮细胞贴壁比间充质晚，所以可以通过一次换液可以纯化细胞。

azzyou

回复 cx4236850 的帖子6 m+ s7 \" E+ R% ?5 k
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漂泊的风

楼主二次消化的目的是不是要回收利用先前的培养瓶啊？这样才说的通，要不就没必要进行二次消化啊，直接丢弃不就行了吗。

luckywen

请教楼主，离心过快对细胞会产生一定影响，请问传代细胞清洗胰酶时，如何控制离心速度？清洗几次合适呢？谢谢！

hxwchou

这个我没加bFGF，长的很愁心

lipenix

非常感谢提供这么好的学习资料！

pear7127

谢谢大家分享，存下这个帖子先。

叶婷

胰酶用于消化、传代细胞。可放在CO2培养箱内3分钟加速消化，时间过长会影响细胞活性！消化完一定要用含血清的培养基终止消化！然后还要加适量DMEM/F12离心以洗掉胰酶！《将第一次消化下来的细胞离心，按一定比例传代（1:3，1:4，有时也用1:5）视细胞量的多少而定》能否举例给我讲解一下按比例离心传代的方法和具体步骤!非常感谢！

叶婷

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% [4 W2 ~6 U* D, L/ Q/ Y5 Y* [请教您一个问题！谢谢赐教！做不同灭活温度下的血清培养细胞的结果实验：90°C ，80°C灭活15min 下的血清变成果冻状，加DMEM/F12绞碎后，离心，取其上清，据说血清内的生长因子在里面。用该上清养的细胞变形贴壁很密！70°C，60°C灭活后不凝固，直接离心，取上清，养出的细胞无贴壁。未灭活细胞有变形贴壁但不密！请问您大于56°C灭活的细胞还有活性吗？做出以上结果有可能吗？此实验方案对吗？

细胞海洋

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