细胞冻存时4度放置一会儿出现液相分离

wxl87

不知道大家，发现没有。细胞冻存时，把细胞4度放置一会儿出现液相分离。大家有没有留意过？这样对细胞有什么影响？

yangpan521

有，肯定的，冻存细胞在4度冰箱里不能超过半个小时，冻 存液对细胞有毒性，所以要有培养液混匀，

Helena110

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zhangyan813

从来没有试过这样的，就像楼上说的，可能是因为你没有混匀，DMSO在16°就会结冰。

wxl87

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4 ?- m+ z" V+ o) h! l* m
8 K, l5 a3 g9 J这个都是混匀后暂时存放在4度，因为还有一批要冻存，所以暂时存放。一个小时就会分液相了。

songzxj

DMSO在低温下会结冰的，还是现用现配，很方便的

starlancer

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是dmso析出来了吧。是不是没有混匀导致的？这个还真没仔细看过，每次在四度放置之后就直接放入-20度冰箱了。

wxl87

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* k0 N. o! @& ~是这样的, 因为我要操作很多细胞的冻存,所以最初做好的一批现在4度存放,等我做完所有的我在放入-80冰箱中.所以就出现了前面说的分液相的情况,现在想想,可能是操作时间长了,DMSO又吸出来了吧.

zhenhuale

DMSO没有这么容易析出来的，建议采用程序降温盒，直接放在-80℃。

songzxj

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) l0 r* B: Z1 z6 V% T6 S你可以配好冻存液放在室温，两三个小时没有问题的。