关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。
" `+ q9 e% z! Z5 C, q& n+ Z2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。5 c$ T! B7 Y  I, w3 w; {: P
3.染色前需加60%异丙醇5min。7 O- V$ b% u# t& @
4.染色时间15~20min。; c# P* Q1 c' e, E: l' p6 U
5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。4 @4 l* P7 i0 t, ?% o' b
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
6 d. ^: M  a: e6 f步骤4 e0 p1 Z& P' r4 ]. ]
1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上9 i5 G! X# H! ^; o, j  Y. Q- y- k
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次
  U- c2 [7 Q9 E# a$ P: _/ k2 N/ |3、染色：加油红O染液染色10-60min
: Q  U8 r' ?( i3 U4 e* V4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着9 d9 [) Q' v2 d# O
5、拍照记录
( I* {' z3 j7 o! V" u
1 Q( o/ {' _0 L. b! o注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢
* s$ I, @! b. C2 |  j
4 U( W% f4 n6 O. R; p+ f% J附图：
. [' M9 j$ [  M- l/ i' t8 N

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子+ E/ u* [$ g2 n8 ]
3 n! N2 @" o4 d1 D! O
好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子3 q4 L4 V+ o# h5 P! `, ]

# W4 d8 ~" L; l5 Z如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子
; Z1 n$ a: Q& ?9 Y4 w$ L( w' _& w
% U% t4 p% E9 y; f5 T一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
4 N, A% Q* U: g5 d) j& h稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因