神经干细胞冻存液为什么要加胎牛血清？

huangfei2010

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10%），我的疑问就是正常神经干细胞培养液是DMEM/F12，EGF,b-FGF,不加胎牛血清的，为什么冻存的时候把生长因子撤掉，换胎牛血清？胎牛血清是诱导分化的啊，虽然液氮保存细胞基本不代谢，可是为什么文献上冻存时都不要生长因子了呢？小弟才疏学浅，刚开始养神经干细胞不懂其中道理，还请大家帮忙分析下。谢谢

xzmcyy@163.com

我冻存仅用胎牛血清加二甲基亚砜，原因没有仔细想过和查过，因为是实验室一直那么做的，而且效果很好，我会查下原因

iseeyou1210

你可以看看这篇文献，他们只是用medium w/o EGF and FGF +15% DMSO来冻存 neurosphere的。
  Z$ m% |. Z- r! q# O/ q' e" O; Jhttp://www.natureprotocols.com/2 ... l_culture_neuro.php

huangfei2010

回复 2# xzmcyy@163.com 4 C0 b/ I0 ^" q" d4 k' }. |+ U5 c! I

/ h3 y  _( o. l- E9 {谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210
( U' R5 p' G  Q% @' S. R$ `: f+ |/ x2 E" R$ \- p% _
6 E. A4 F) W1 x
    谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210 3 ^$ }, }) m' P8 N
6 ]( q$ a2 L2 d" B
Remove the supernatant and re-suspend the cells in 10.0 ml SFM (without EGF and FGF) containing 15.0% dimethyl-sulfoxide (DMSO).
' N6 k1 ?' M6 p, ~+ q5 X; KNeurosphere viability can also be enhanced by the addition of 20% fetal bovine serum (FBS) to the freezing medium. However, keep in mind that FBS will induce differentiation，谢谢你的文章

savid888

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10 ...+ M3 i& P+ H  y3 O4 `# t; |# v4 Y  R
huangfei2010 发表于 2010-5-19 09:48

3 Z8 ^3 ~- Z, I+ L, m
& Q9 x+ e4 O" a& P& k$ S8 I1 w; l神经干冻存时还是多用serum-free培养基吧？我们就这样用的，但是复苏成活率确实比较低
% Q6 C7 ^! H1 W( c; m( s# T2 ^" ]你说的文献是哪篇文献呐？

huangfei2010

回复 7# savid888
- H( y+ W/ U# h( x* _) x4 `2 U" C  l& j  E" q6 d7 i
( m' l/ F5 [7 z
    文章发上来，你看下，能把你的冻存方法和相应文献也传上来吗，谢谢

savid888

我们冻存方法沿用师兄师姐的做法，没有文献呢。" P7 }: X0 E2 l+ o$ j
培养神经干用的无血清培养基+10% DMSO，梯度降温冻存

meirongwan

可以用全胎牛血请加dmso复苏更好