我做的“ips”，请战友们指点（附图） - ips专区干细胞之家



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查看: 67335\|回复: 26	go 我做的“ips”，请战友们指点（附图） [复制链接]

小刀

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楼主

发表于 2010-4-28 22:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

本帖最后由细胞海洋于 2010-4-28 23:02 编辑

做了大概半年的ips诱导。总之很是不顺利。现诱导四十余日，图片如下，望前辈战友指点/ i; ~) l$ L% K

诱导体会：4 d- h+ g, R& A" u6 {
1。在诱导过程中大约二十五六天时感觉镜下可见克隆特别多，但是，没几日，克隆就会迅速减少。我是隔日换液，考虑可能因为换液不勤导致克隆分化8 C+ ]. i$ C3 v- J- N2 a0 ?
2.MEF 处理后，细胞生长速度仍然较快，于是就产生了，大量MEF生长的状况4 L- K3 R) F# Q( s H
3.貌似的小克隆总是不见其生长扩大，不知道原因为何？莫非不是？

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小刀

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沙发

发表于 2010-4-28 22:50 |只看该作者

另外，ips是不是如昙花一现般的即将谢掉了啊？: D& n+ {# J0 r- j) E/ l @
前辈们请高见！

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daviehe

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藤椅

发表于 2010-4-28 23:12 |只看该作者

顶楼主

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fish_zbw1985

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板凳

发表于 2010-4-28 23:25 |只看该作者

有没有做过AP染色或活细胞染色呢？

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双刀

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报纸

发表于 2010-4-28 23:50 |只看该作者

做的是人的吗？

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双刀

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地板

发表于 2010-4-28 23:51 |只看该作者

有没有其他照片？怎么大的克隆只有一个？

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wangzhuo822001

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7楼

发表于 2010-4-29 11:04 |只看该作者

MEF 处理的丝裂霉素浓度是不是不够？或者是MEF 细胞浓度太大？

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wangzhuo822001

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8楼

发表于 2010-4-29 11:06 |只看该作者

还有就是是不是丝裂霉素作用时间不够

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anxjs

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9楼

发表于 2010-4-29 16:53 |只看该作者

看你图片，诱导40余日，饲养层居然还有这么高密度，特别是第三张，有点问题啊。MEF处理后还会生长，肯定是丝裂霉素没处理好，我们丝裂霉素浓度为10ug/ml，T25瓶子长满MEF后我们按4ML的液体量MC的，处理2.5h，如果MC配好后很久没有用，最好再摸下时间，可以适当延长30min。克隆多的时候可以挑几个做下AP染色，确认下先。