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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑
8 I" h# I9 y$ U
4 N8 }8 u' U% CRT，( }9 B9 F! L' K8 M+ w0 W6 e
1 F) l) y# w! P) E新收获的人源脐带MSC，P5，按照相同的工艺和操作收获以后，用台盼蓝染色测活率，偶尔95%+，偶尔只有80%左右，请教论坛里的各位大神，可能的原因？？( c7 @# x& K9 P, T X/ E
大致的操作如下：( [5 T. o! h2 r6 i: G7 k
冻存的P4融化，大约8000/cm2培养至90%融合，8 J w& {1 B& z' E2 w% ]
倒掉培养基，0.9%NaCl洗一次5 l. [0 K' l9 A
加trypLE消化，吹打过滤+ r; B3 z" s% Q# J( t2 i
取样计活率
3 }4 Q2 N1 G8 D+ ?3 ]5 g/ `6 _3 |% n0 X& u
这里面P4的冻存细胞是同一批，操作人都是熟练工，试剂批号短时间内也没更换过，& t+ e- l: l# m6 U5 q8 t3 b4 ^
即使同一批接种的细胞，分上下午收获也有比较明显的活率差异，所以苦苦百思不解 $ X' n+ {) c4 W0 i* i
1 ~) U1 [' p% P1 h+ \3 e目前看出的规律是：总体活率不高的时候，细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团，这样的细胞团里大多是死细胞，至于为什么会产生这样的死细胞，还是想不清楚 |
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发表于 2018-5-18 10:40
