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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑 , i& j3 o W; }/ u) c0 X) l
% e! R7 e" Y$ U, ~# J
RT，( D% ~( d" H% n% [( ~* O
5 M% }# L1 f" s7 K/ l2 A: D0 h
新收获的人源脐带MSC，P5，按照相同的工艺和操作收获以后，用台盼蓝染色测活率，偶尔95%+，偶尔只有80%左右，请教论坛里的各位大神，可能的原因？？
+ {8 }/ @; Q; _% b, K2 `. ^大致的操作如下：
: r9 P4 D0 V: z8 O* X冻存的P4融化，大约8000/cm2培养至90%融合，( l# A7 ?: g/ V2 v# y! W) H) Y
倒掉培养基，0.9%NaCl洗一次) G. g ?) L F R
加trypLE消化，吹打过滤
9 |1 G9 X& E. E! K$ A' @取样计活率% P6 i/ ~4 r. w/ n- S
8 B/ V# j5 K1 C0 _# ^$ _这里面P4的冻存细胞是同一批，操作人都是熟练工，试剂批号短时间内也没更换过，
; j+ W/ s0 j/ y+ d, V9 j1 K即使同一批接种的细胞，分上下午收获也有比较明显的活率差异，所以苦苦百思不解
+ N% t) z0 i; E' V+ p
* `. V. B6 X! ~0 l: {目前看出的规律是：总体活率不高的时候，细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团，这样的细胞团里大多是死细胞，至于为什么会产生这样的死细胞，还是想不清楚 |
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发表于 2018-5-18 10:40
