洗之前我观察细胞了里边应该有细胞，细胞用PBS洗一次后，再用胰酶消化后，细胞基本没

jenny114402

4 h/ a3 V$ O  b" Z$ ~: [" p* X

" T& C3 @' j7 E, ~- V- I我记得洗之前我观察细胞了里边应该有细胞，细胞用PBS洗一次后，再用胰酶消化后，细胞基本没有了，不知道为什么？

yooung

可能原因1：细胞贴壁不紧，PBS洗掉了。: E  M( k! I- B8 ]! i+ T
可能原因2：胰酶消化掉了。从你表述的话：“里边应该有细胞”，可知里面细胞可能不多，如果按正常的胰酶量去消化，可能造成相对胰酶过量。

木头1102

有没有可能细胞量比较少，离心时离心力选择不当，导致细胞没有离下来或者弃上清时损失比较大

xuyang0317

我觉得最大的可能性是细胞贴壁不牢固，在你用PBS清洗的时候被清洗掉了，在细胞较少的情况下你不应该急着进行传代，而是要想办法把你的细胞养起来再进行传代，你消化后没有观察你的培养瓶吗？初学传代时都要看消化后的培养瓶的，总结传代经验消化时间吹打力度清洗得怎么样等，这些都要谨慎学习！

zhangjieyctc

回复 jenny114402 的帖子. S, m$ ~9 E( y7 Y4 I/ E) ~

$ w9 p& X$ u9 Y+ ?看来是因为你的细胞贴壁不牢，原因有很多，比如洗的时候动作幅度比较大，也有可能是因为你的培养皿（或培养瓶）培养面没处理好，导致细胞贴壁不牢的；还有其它原因可能，比如消化过度，离心速度过大或过小等。

jenny114402

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1 R& b5 {" `5 e( }# F
' `2 V4 T. x  F: N- e+ @- @, P细胞基本没有，能看到几个，而且和它一起培养的不同脐带细胞都正常贴壁，细胞养了3天

jenny114402

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$ d) g$ d% ^: E) }% w! V$ P
  ^- }- D- r# z' }+ ~还没有离心呢，就是胰酶消化时观察细胞，发现瓶里细胞几乎都没有了

jenny114402

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3 D  B6 a( n7 P) K; V% b7 W$ m" g+ Q4 U8 `8 D% d' j: S6 G+ n
我就是消化后观察的，里边基本没细胞，细胞我养了3天，量也还可以

jddakui

消化之前有观察吗？一般贴壁细胞不会轻易被洗掉，除非细胞有老化现象，还有就是镜头是不是没有对焦？细胞都在瓶底角落？
9 ]: j9 I+ `5 e

lgfffancy

很简单， 你的细胞铁壁性不强，用PBS冲洗后，细胞就被洗走了一大部分，
5 }  k. v# M, N" ]; W, ?: ]& u所以你用胰酶消化后，你发现细胞不多了。