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1301918986 2011-6-16 08:39
sunjianhua2000: 那外面的白色羊膜层需要去除吗?还有你的培养液血清浓度为多大?
哦,外面的羊膜层是要去除的,只是我们再做的时候一般羊膜层已经不在了。我的培养液血清浓度是10%。
1301918986 2011-6-15 08:32
sunjianhua2000 : 你能把你原代培养的细节告诉下吗,最好越细越好。例如组织块的大小和间距,原代传代时间及传代判定标准,传代比例等!谢谢了,急求!! 1、将脐带置于大玻璃平皿中。 2、加入冰冷的PBS 20ml,尽量去除表面血污。 3、剪取约2cm长的脐带,剖静脉,剥离出两个静脉,用PBS洗净血污; 4、将脐带组织剪切成2mm3左右的小块,在剪切过程中可以适当向组织上滴加1-2滴的培养液,以保持湿润。 5、将剪切好的组织小块用眼科镊移入培养皿中均匀放置,块间距0.5厘米左右。    至于传代时间是当大部分克隆部位的 ... ...
gaorongbest 2011-6-2 08:15
sunjianhua2000: 你好谢谢你的回复,我想问下 如果组织块贴壁并下面长满细胞,当传代时用镊子取下组织块,不会影响细胞贴壁把?还有取下的组织块你们还做继续贴壁培养吗?谢谢
细胞一般消化几分钟才能消下来,怎么可能和组织块下来呢?我们一般不会再用取下来的组织继续培养了,我们如果继续做的话,会用新鲜组织
gaorongbest 2011-6-1 08:14
sunjianhua2000: 我在做脐带间充质干细胞培养,目前有一批原代细胞长到第10天了,培养皿中有几块组织块细胞长的很满,但还没达到皿的80%,如果细胞生长顺利的话6月3或4号应该可以 ...
我们都是用镊子把组织块拿下来,如果漂得多的话,和培养基一起晃晃就掉了,细胞还是贴着的,昨天我们刚做的原代,呵呵
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