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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-11 11:08 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子
* \0 D) F0 u, O3 v4 J6 f: L/ r/ I2 t0 |# q
应该不是细胞代次问题。你说第一天贴壁很好,有图片吗?
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藤椅
发表于 2012-9-11 13:36 |只看该作者
无图无真相,最好传几张照片看看哦:)

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-9-11 21:53 |只看该作者
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hiPS细胞复苏很不容易,第一天看上去有克隆,其实肯定活性不是很好了,复苏过程中要加ROCK inhibitor,这个很重要!
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报纸
发表于 2012-9-12 07:51 |只看该作者
回复 小禾禾 的帖子$ s2 A- d% D; O, c$ t
2 k6 r$ W8 |' I5 }( r8 v. P% @

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地板
发表于 2012-9-12 08:07 |只看该作者
回复 frankieisme 的帖子
9 E: p) ]) X8 x" s( G: C( M+ m* [
, Q( L: d6 x  |& g) p& \" `1 c我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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小小研究员

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发表于 2012-9-12 08:13 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子
$ Y8 _: J$ O' m' _: S3 O) ^7 o5 A3 e
回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb 可以使用qq截图

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发表于 2012-9-12 08:18 |只看该作者
回复 细胞-77 的帖子' ~8 s% t/ a! S$ T7 m$ b
: f- S- m1 ~, P1 _
我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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发表于 2012-9-12 08:53 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
0 E6 M' X) i' @1 S+ o/ F/ P/ J! K' }( ^  i1 g
& ?) R% [3 `" [4 _4 I6 z/ r1 k9 X5 ^
" w! F  v3 C, F# a8 U& d4 y
补充内容 (2012-9-12 08:54):
( B7 k. G6 b( W2 k) [& }- L这是复苏后24h的照片
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发表于 2012-9-12 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子6 D0 i  f$ G, i2 }
2 E* H0 w7 r: Y5 c
谢谢指点!
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