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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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包包
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发表于 2013-7-23 22:37 |只看该作者
这几个比例每个公司都有自己的体系,体系一般固定不变,但这几种质粒在大提时想得到高质量的质粒有些困难,Mage、MN的试剂盒都试过,也不是很理想。每一批次的质粒质量直接影响每一批次慢病毒包装试剂盒的质量,必要的时候根据定量PCR的数据效果,会尝试稍微改变体系,这是一件很费时费力的事。
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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 Dancmacabre 的帖子
3 d" b2 a) Z, K. S
3 E  C" b: P1 L9 b. K3 S7 t你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样( A- V9 V3 B1 ]% ]/ z% q9 a7 @
$ ^( S0 n' q0 ^. Y. D, R9 M2 I& X
否则他会看不到4 g) A# z7 o9 h1 P1 O5 u# h$ }8 @. ^

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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 翱翔的鱼 的帖子6 j  ^6 I9 h7 V* b

$ x, ?: Y0 f' D看31楼

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发表于 2013-11-7 13:00 |只看该作者
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这套系统我也在用,在包pCDH miRNA时,效果很不错,浓缩后滴度可达8次方。
7 S( r9 p/ V" n& y: r8 s但是包装pLVX时效果则很差,不知道是不是兼容性不够好。
$ P4 H0 i" q. q0 q2 }  C% i8 D9 ]我觉得pLP2的量不能太少吧?因为Rev不仅要带入核,还要允许pLP1上gagpol表达,个人觉得5:6:5:4是不是比较合适~
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发表于 2013-11-19 16:31 |只看该作者
回复 sj03572001 的帖子
( t' {8 {0 S2 Y4 g3 f* y  k4 _5 b' ?( m; I* V4 A
一点问题,
" g( d9 c. x0 [  r$ D06NP里的质粒质量比例 transfer:pMDL(gagpol):pRev(rev):pVSVG= 270:176:68:95
- {' J) ^" a+ W' k9 |+ S# j3 D: k
如果考虑各质粒的大小改为mol比的话,我算了一下大概是=34:20:16:166 h' L$ H/ ~9 _% a7 o" n
也就是说,表达质粒与包装质粒的mol比例为=34:52 约等于 2:31 i9 ]4 M4 n, ?
" X) |9 Z3 X8 |) Y3 Q& m
我一直困惑所谓的比例是应该按质量还是mol计算。  l$ [* r/ _5 z  H( U2 L* i

% L8 l+ i: ]+ }还请高手们解惑,=)拜谢了~
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发表于 2013-11-19 20:43 |只看该作者
还有一套包装系统PSPAX2+PMP2G跟这个包装质粒系统有什么差异
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发表于 2013-11-20 08:07 |只看该作者
回复 shermin 的帖子: W2 e# Z5 p" h, r
) O5 H) w9 ^) N" j
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发表于 2013-12-7 21:21 |只看该作者
1:1:1:1出来的效果不是很好啊
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发表于 2013-12-26 11:28 |只看该作者
我也想知道哪种比例效果最佳,求高手指教

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小小研究员

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发表于 2013-12-30 01:19 |只看该作者
回复 zje6265610 的帖子! \6 e# p$ s3 ~7 X+ q; ^
0 _2 o& T7 s# e* c& @* M3 J% A
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