请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。* w5 g" q% G- E% Q+ q' b2 C
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。, i3 B# q* F& f' r3 u
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。: [1 v+ M* o3 X! B" q
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
3 l# Y) k! O0 a第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
* l7 P$ o$ b- r+ f2 S! n6 X3 L5 y$ K之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。" q* H* R7 W( Q4 }- f6 E
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。" ]3 S9 \, M% \, u) N. j
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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1 f3 w; m; Z; T/ ]( @8 V" t
* G$ w9 ~6 @6 D; h& f1 j& }3 J脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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/ S$ M; l1 F' l$ Z0 D" H
8 n. D5 w4 N* z* h% T: n谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子0 j5 x( v( i# j) @  X

5 ?* D8 P0 a% r# m. f' _6 y请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

回复 bloodroses 的帖子6 z! D1 @& m# o

- p( {. c* Z5 R  l) c8 W和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子) u1 B0 }2 s: Q# G
1 C. X+ P2 k# [  u7 t+ L* _
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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2 o% b0 w8 r6 ]- t; n* u3 [% b
7 Q7 p, I' y, e, k我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
: t0 G; d- V' N3 U! u% x小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
0 H9 ~" l9 x; [9 u& S! Z7 ~9 p诱导 ...

( x/ S* m. c& }双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

回复 lyd20042004 的帖子7 Y- U' [7 M4 p) }8 w' C

: L5 L2 o; r( ?. \, X. J: v目前的数据只是个例# ~$ y, \/ G7 Y. {
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说