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楼主: jifengtang
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贴块法培养MSC,脐带的处理若干问题   [复制链接]

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发表于 2015-11-27 16:18 |只看该作者
1,说法我觉得靠谱,结缔组织我看到过的。不是很明显。: N& G; [$ x& t5 ?$ |
2.把膜剥离是好的,羊膜贴上不但阻碍华通胶跟底面接触,而且还会爬出上皮细胞样状杂细胞。不剥离的话,影响肯定是有的,但不是很大,因为杂细胞在传代后会淘汰掉的。
& @2 ^! N3 m* P6 j) L3,没有去除,感觉影响不大。/ M% \# V" \- s# ~/ s' H
4.手术刀不好用,剪刀更方便。
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发表于 2015-11-30 01:43 |只看该作者
回复 小豆芽 的帖子! ^- h1 F; p7 c  s

* ~9 @) Z- U8 |9 m/ h" h, T8 w怎样可以让组织块贴的很牢?我的总是飘起来,求赐教!
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发表于 2015-11-30 13:49 |只看该作者
回复 tlms1991 的帖子; i  T) O  Y# p+ F8 n

9 ]' O7 T4 J" F( `) D脐带处理时去掉羊膜、动脉、静脉,将华通胶剪碎大约3mm3,将剪碎的华通胶均匀铺开,倒置放置4-6小时添加培养液。在培养过程中注意尽量不要晃动。
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发表于 2015-12-2 00:06 |只看该作者
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回复 小豆芽 的帖子
3 z7 C8 |# h0 k, V1 i. q) y: @) f3 K) e% d
我现在做的是剪成2CM左右小段后  剪刀穿过静脉从中剪开  然后刮掉静脉壁  剥出两根动脉  再私下胶质  
- \/ Q/ a1 t, f6 d: J8 T请问下静脉壁不刮干净的话影响大吗
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发表于 2015-12-2 13:12 |只看该作者
回复 正义的花生 的帖子) x( e) V) Z! W* i" W' l

3 c) W4 x/ q. {! d8 I影响不是太大,在培养的过程中,细胞也是会慢慢纯化的
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发表于 2015-12-4 13:11 |只看该作者
回复 小豆芽 的帖子8 L4 f( l5 f2 e# [/ ]- D4 r

( `  z, d! c  Y1 t1 Q( j( W谢谢哈!我试试。

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发表于 2015-12-8 11:07 |只看该作者
1:准确!
5 z* H1 E, z9 W! t! j/ ]% N! ?& {2 K, j6 a8 E5 Q" T4 o
2:我认为影响不大。- E, S3 l; ^" S% D
2 S5 {+ [* Q* h9 I! J; t
3:我建议把结缔组织去除,因为脐带外表面与皿底接触很难爬出细胞。7 \8 ^, D0 Q  n9 q7 Z6 M3 e

: ]; i/ G2 z  _' G5 i1 L) x( P4:手术刀切的比剪刀剪的大的多,也有文献说手术刀如果切的大小合适,效果很好!5 v+ J& ?+ j" ^9 P! [' P- ^8 |* \
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发表于 2016-1-21 09:47 |只看该作者
我们没有去除羊膜,只是剥离了血管。做出来效果也还是很好的。
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发表于 2016-1-21 15:19 |只看该作者
回复 wuhuaguo88l 的帖子
% q* n( y' {7 O1 B$ ?. i0 u9 G" O  g1 D2 S) c/ G# B
结构既然没错的话,那结缔组织在里面没有影响嘛?
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发表于 2016-2-3 14:46 |只看该作者
回复 jifengtang 的帖子" m) C0 e- R+ w( f% N

8 @& Y& [  l5 P问题1:
$ R6 i# l4 O5 j2 J1 V, x) o) |% G脐带结构的说法准确+ @& Q6 @; G  U' ]1 ?
问题2:$ q+ ^8 X; d  R. r
处理时不剥离羊膜,上皮细胞会影响原代细胞爬出3 Q# n. h$ x$ p8 N2 t6 S& e
问题3:
& \+ h: C# k* t" }里面的结缔组织不需要去除,否则华通氏胶得率太低* S0 G1 M! [3 n$ P7 }1 v- F- y4 Z
问题4:* D& X9 _7 y/ G% k$ h- H
一般最后都是用剪刀剪碎华通氏胶,用手术刀切成小块降低了细胞爬出的效率
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