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hiPS生长状态时好时坏,你们是怎么调整状态的?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-1-31 12:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我在养hiPSc,克隆状态时好时坏,有的时候一传代就分化了,或是刚重编程挑克隆5.6代的时候很容易死,大家都是怎么调细胞状态的呢?探讨一下。
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沙发
发表于 2015-2-3 15:10 |只看该作者
刚刚重编程的细胞系是很不稳定的,如果不是病毒整合进行的重编程,当非整合的外源因子随着时间的延长而被稀释掉,很可能有些克隆是无法持续IPS细胞状态的,所以正常传代把这些没有完全重编程的克隆筛掉是很正常的
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藤椅
发表于 2015-2-3 15:44 |只看该作者
加rock inhibitor 就这样一直传···
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板凳
发表于 2015-3-5 10:02 |只看该作者
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如果你是用滋养层培养的话,滋养层的品系,密度非常重要,如果无滋养层培养的话,培养液成分,细胞传代时机,大小就很重要,分化的细胞会分泌因子导致未分化的细胞分化,所以在培养和换液时及时剔除分化细胞,保证传代的都是状态最好的细胞。干细胞就是这样,好的越来越好,差的越来越差。
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