流式检测干细胞

风自在流年

请教各位，我把间充质干细胞注射到小鼠体内，想利用流式的方法检测干细胞在体内各脏器的存在情况，请问干细胞在体内分化情况各不同，之前在体外即使建立了模板也不一定可以用上，那我检测时在进行前处理时需要怎么做，谢谢。

scottist

流式固然强大，可如何检测在各脏器的分布？是否该考虑用同位素标记MSC，静脉注射后再检测MSC在各脏器的分布；或者简单点，用荧光标记物如DPI等将其染色，然后取脏器、做切片、找细胞，其实这个和大海捞针也差不多，如有活体荧光显微镜可能稍微高效一点。抑或你们实验室有独门绝技，用流式检测来检测？能否满足一下在下的好奇心？谢谢！

风自在流年

回复 scottist 的帖子! ^7 M' V7 I& }& r1 ]. P
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谢谢回复。

yuanyecat

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+ E% Y! A$ q; n) T. J流式检测不了干细胞在器官分布的。放射性同位素，你们实验室有没有专门的实验室，不是所有实验室都允许做放射性物质的，而且审批很麻烦。当然们如果你们实验室已经有放射性实验室就没问题了。! B- x( \6 _' r; e, @! @& @$ o
我推荐你看看这本书，对你会有帮助。1 E! T0 P0 g( p/ y) w) Y
《Current Protocols in Stem Cell Biology 》
+ s6 D, ^4 a; P/ Z# sOnline ISBN:9780470151808+ K1 J! M8 t* c8 P
DOI: 10.1002/9780470151808
- c( e8 f# z) S2 |' J

williamsunny

可行的方法是注射表达GFP的间充质干细胞，然后观察在各脏器的分布。这个比较可行
% ~0 B+ M: U' e1 p8 x' o1 x" f* Y或者局部特殊部位可以利用双光子显微镜观察分布情况

风自在流年

回复 williamsunny 的帖子% {! |% ^( g( E; M

! g( p9 I- \3 K. \0 A; J我确实想用标记了GFP的细胞打到动物体内，但是不知道怎么观察，谢谢

cleargreat

冰冻切片观察，或者制成细胞悬液上流式。

风自在流年

回复 cleargreat 的帖子) |3 k6 i! T! o( q. s8 @
# U+ r7 o# k5 s+ \8 G& y; B: W/ t" ^
谢谢你的回复，关于上流式，请问MSC在体内会分化，那我将各个脏器需要如何处理呢，比如之前如果要检测淋巴细胞可以使用淋巴细胞分离液，而这里我不知道怎样处理各脏器，谢谢

杏色玻璃

检测细胞在体内的分布，您可以将细胞染色比如常见的DIL染色，之后静脉注射小鼠，然后做切片，荧光显微镜观察，这个效果很好的。

sdudai

这样流式是不能检测的啊，难道你是把小鼠整体切碎了，做成单细胞悬液然后上流式？天方夜谭了。。。我们做过细胞定位，最简单直接的办法是先让小树表达GFP然后在做回输，回输后1小时，2小时，4小时。。。定位细胞，再者就是器官切片喽。