请问各位大神有没有比较详细的mESC分化protocol？

prince

最近在培养mESC，之前一直检测增殖，但是现在要检测分化，小弟没做过啊，请问哪位大神可以提供一份比较详细的protocol？最好也有分化后的检测方法，有文献也可以推荐啊，谢谢啦！

ceshishua

首先你要说一下分化成什么细胞啊？6 K3 V( ?4 Q+ e' R+ [* L: r
推荐一本书：http://product.dangdang.com/21066471.html! [$ j# g- c4 l, D8 y9 y
《精编干细胞实验方法》 % M- D. y7 ?3 z1 S7 k& s% s
作     者（美）兰扎　等编$ T+ b$ Z( ~. Q% U
出 版 社科学出版社$ p* `7 b" w' d' o5 o
出版时间2011-3-13 a. ~$ H% x: r; H% m9 ]1 `
ＩＳＢＮ9787030301826

prince

就是简单的ES细胞向3胚层分化，然后用RT检测各胚层的表达mraker？

realyy10

去feeder,去LIF基本就行了，密度低一些。可以考虑做悬滴形成EB后再放到板里。

yuanyecat

9 ^) I1 S5 H& D" b. t. n0 Z& ?! r6 `5 E9 L% \9 F# R
有一本书，叫《Current Protocols in Stem Cell Biology》，里面的charpter 1，section D 有你感兴趣的内容9 o; N- K! f7 o9 n
1D Germ Layer Induction/Differentiation of Embryonic Stem Cells
2 ?2 u" z! G6 t3 ^# r1. Unit 1D.1 Germ Layer Induction in ESC—Following the Vertebrate Roadmap4 W8 d0 F* c& j( q7 @
2. Unit 1D.2 Formation and Hematopoietic Differentiation of Human Embryoid Bodies by" ]; ~  m, g1 r  A/ P. M
Suspension and Hanging Drop Cultures+ V8 |9 p' |% y% ?( `6 s
3. Unit 1D.3 Directed Differentiation of Human Embryonic Stem Cells as Spin Embryoid Bodies
6 A0 P6 q, C- `% E0 Aand a Description of the Hematopoietic Blast Colony Forming Assay1 [4 p: Q9 r+ \6 k! P  w
4. Unit 1D.4 Differentiation of Human Embryonic Stem Cells in Adherent and in Chemically2 ^2 ~/ a9 V! O/ u) h
Defined Culture Conditions, K; U2 e+ K% C: Y1 c
5. Unit 1D.5 Isolation and Differentiation of Xenopus Animal Cap Cells

yuanyecat

还有一篇是讲非人类的胚胎干细胞分离，也是很不错的。‘Derivation and Characterization of Nonhuman Primate Embryonic Stem Cells’$ a( {, L# J  d# r5 T' Q' K8 N3 m
http://onlinelibrary.wiley.com/d ... Authenticated=false