关于胚胎干细胞的消化传代问题

shaozi402

我们之前的人胚胎干细胞系都是accutase酶消化传代的，由于低温冰箱断电导致细胞种子受影响。复苏了几孔细胞仅活下来两三孔，且分化的比较多，也有没有分化的，于是就想用刮的方法把没有分化的细胞刮下来然后再传代。但是出现了一个问题：刮之前需不需要更弱的酶消化，刮之后需不需要将细胞团块消化为更小的团块？

jojo1988509

我一直手工传代，挂的时候没有消化，刮完以后如果团块太大的话在15ml离心管中小心吹打，手动打小一点的团块，力度温柔一点，稍微大点力度就吹散完了。

woshizh

如果你是要刮掉分化的细胞，就挂完后再消化传代，我们用的dispase。& N% W$ U- U' i4 e5 u+ {, f; T( z
如果是刮好的克隆块，就得先换液后再刮，刮完后把培养液收集离心传代，不用消化。

nien

我也一直手工操作，过程还可以

shaozi402

好的，谢谢大家，我知道怎么做了。多问一句：这种排除分化细胞的方法效果怎么样？
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细胞海洋

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shaozi402

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好，以后知道了，谢谢

jojo1988509

回复 shaozi402 的帖子" b0 [0 i/ U  z' s+ O. R% ]  T5 p
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手工传的时候都挑的好的部分传啊，所以都还好。