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[请教] 请问WB封闭到底是BSA好用还是奶粉好用？   [复制链接]

yinchong42

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楼主
发表于 2014-10-29 12:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本人PHD一年新生，做WB每次用BSA不论多大浓度必出杂带，用奶粉则极少有类似问题，请问大家是否也有过类似的经历，谢谢！
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wangshan

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沙发
发表于 2014-10-29 13:09 |只看该作者
做WB一般很少用BSA封闭，5%的脱脂牛奶含有的蛋白比较全面，封闭比较完全，非特异性结合少。脱脂牛奶物美价廉。
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qingxingruyu

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藤椅
发表于 2014-10-29 13:34 |只看该作者
没用过BSA封闭，听你这么一说，更不会去用了
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moluxingke

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发表于 2014-10-29 13:41 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
脱脂牛奶封闭在western blot中是一种很常规的方式，一般实验室都在用。
) g6 t) _" _* q- y* H# m+ d" k而BSA封闭倒是可以在做免疫组织化学的时候用，虽然贵点，但是用量较少。
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aulenuyah

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发表于 2014-10-29 17:14 |只看该作者
有一些蛋白用奶粉很好，有一些用BSA比较合适。得具体问题具体分析。可以在开始的时候试试
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yaolinzhang

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地板
发表于 2014-10-29 19:09 |只看该作者
回复 yinchong42 的帖子& n/ g" m2 N  k& Z

1 n9 ?# v0 U+ e; y8 E" XWB一般用5%的脱脂牛奶
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xiaostou

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7楼
发表于 2014-10-29 22:31 |只看该作者
我们都是用脱脂牛奶，没用过BSA。
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wagumaxida

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8楼
发表于 2014-10-30 10:29 |只看该作者
BSA用在免疫组化这种特异性较强的实验中效果好，脱脂牛奶封闭更全面适合wb
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yinchong42

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金话筒 优秀会员 研讨会精英

9楼
发表于 2014-10-30 13:53 |只看该作者
回复 aulenuyah 的帖子
7 A1 Z- R3 [; g
3 F. T$ `/ u) q: x. Y也有说是分公司考虑，似乎abcam和cst公司的更倾向用BSA，不过我做cst的β-cat，BSA封闭还是跑得全是杂带……
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晴斗斗

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10楼
发表于 2014-10-30 14:06 |只看该作者
我们做WB用的10%的脱脂奶，有一些抗体也是有杂带的，可以在孵育二抗的时候加点脱脂奶去除杂带；BSA比较贵，据说标磷酸化的抗体的时候，用BSA效果比较好
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