癌细胞条件培养基制备？

zerollx

想用癌细胞的条件培养基用于后期的实验，这个条件培养基具体是怎么制备的啊，多少细胞，多少体积的培养基？求指点，不甚感激。。。。。。

yuanyecat

有文献报道，人类乳腺癌MDA-MB231细胞所制备的肿瘤条件培养基(tumor conditioned medium, TCM)中的白细胞介素-8 (interleukin-8, IL-8)可以促进人类的间质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)的迁移。同时这种TCM也可以促进脂肪组织来源的干细胞的迁移。消化、接种HT29细胞于6孔板中，接种密度为105个/孔。24 h后移除培养基，用PBS轻柔洗3次，而后加入无血清的McCoy’s 5a培养基。继续孵育24 h后收集培养基，1 300 r/min离心5 min，取上清。−20 ℃保存待用。/ q( K- q7 i/ C/ ?; |1 e" \/ N) I
以上link：http://wenku.baidu.com/link?url=uKh9Xt24F3dqwn5bO7uvSwSHzBnemkM1rSWfm5xT3E8zbISKGXJM4c3a1b3xd-H96jWOJZOYNVsg7-kFJYKsTxGcLWkfPLoi7kOl25AaL0y

zerollx

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谢谢回复，请问加多少体积的培养基 可以连续收集多久？