贴壁法分离脐带间充质干细胞求助

chenlin080102

把脐带华通氏胶剪碎后贴壁，可能是培养基加多了，最后的组织块都是飘在培养基中的，并没有多少是贴上的，所以每次要十几天才能开始爬出一点点，而且密度很不均一，请问是不是只有贴壁了的组织块才会爬出间充质干细胞，漂浮中的不会爬出来？有什么好方法能让组织块很好的贴壁？

wf78365421

前12小时只加少量培养基。待组织块贴牢靠以后，再加适量培养基。

fuyinsheng

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& k& t9 N. z# e7 F# `1 t; C, R
不是知道你用的是多大的培养瓶，组织块培养的话以T75为例，可以先加入5-7ml培养基，然后待过夜贴壁后再补充到10-11ml进行原代培养。另外组织块不要剪的太碎，增加组织块整体重量促进下沉贴壁。

20084720113

第一天的时候只用少量的培养基滋润瓶底即可，基本不加培养基，倒置。第二天再补充10ml培养基进去，以T75为例。这样基本都能贴上，只有那些太小的，或太薄的组织块会飘起来。

frankhu

先把剪碎的组织块均匀的排布在培养容器底部，然后在加适量培养基（刚好浸没组织块），在培养箱中培养4个小时后再补加培养基。

tess1029

贴附并伸展，是多数体外培养细胞的基本生长特点。最开始为了让组织块顺利贴壁 应该尽少加培养基，以防组织块脱落移动，可以转入培养瓶静置半小时，再加入培养液。

屋檐上的乌鸦

我9号晚上剥了根脐带，今天我看到有一小块细胞爬出来了！之前做都是一个礼拜左右
9 z) c7 D" y! f( O/ ^/ q我就简单的说下我的方法吧。你把华通式胶剥下来尽可能的剪碎，接种到培养瓶内，尽量平摊，不要让组织块聚集到一起。加2ml的培养液。24h后补液再加2ml。在拿培养瓶加液和观察的过程中，切记动作过大，培养瓶要平拿平放！

chenlin080102

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" x' j+ v1 d) E我用T25瓶养的，第一天只加2ml培养基，可是细胞都贴不住？是不是加太多了？

chenlin080102

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我用T25瓶养的，剪得还挺大块的，第一天只加2ml培养基，可是细胞都贴不住？是不是加太多了？

chenlin080102

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我用T25瓶养的，第一天只加2ml培养基，可是细胞都贴不住？是不是加太多了？