胚胎干细胞负筛选问题

gscao

请大侠回答问题4 @) O8 {- F. t& T2 ~1 S& x
    小鼠胚胎干细胞基因打靶常用的负筛选有哪些？最好打靶筛选后不影响生殖系嵌合的负筛选方法，谢谢！

genedu

按照最先利用正负筛选系统作为提高基因打靶效率的实验之一，用tk基因作为负筛选绝对没有问题，相对用的药物是FIAU，小鼠胚胎干细胞的筛选浓度为0.1uM（参考）

gscao

非常感谢！我还想问楼上，FIAU和GANC都可以用吗？还是用FIAU更好，能否告诉公司？另外，donor载体必须线性化吗？我在有些文献上看打靶载体不一定线性化。

genedu

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4 d. R9 l1 c- u9 g6 l4 b( {+ [7 u您好gscao，首先，您在我的帖子上点回复我才能看到。FIAU还是比较好用的，最起码在我们实验室用FIAU绝对是没问题的，公司用的是Moravek Biochemicals and Radiochemicals，M 251 1-(2-Deoxy-2-fluoro-ß-D-arabinofuranosyl)-5- iodouracil。一般是需要线性化的，那样效率比较高，但是不能一概而论，建议两个都做，择优而行

gscao

genedu，您好！您的建议很好，非常感谢！

细胞海洋

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你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样- I, r9 j8 f5 r# {
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否则他会看不到
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gscao

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9 j$ [9 }$ t( B" X4 C- T& ?8 s! {
& p( n) ^" N+ f% V2 Q4 ySigma公司的FIAU可以吗？你建议的公司FIAU很贵啊。

genedu

回复 gscao 的帖子  v, ~5 h$ g/ @' R: C0 ~6 m
1 G1 f& W* j4 D- {! T' p
可以的，没问题

gscao

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8 X: P( Z1 c% s% Y( H
1 i7 e5 K, ?! v9 J1 x+ iThank you very much