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[请教] 长片段质粒的转染效率 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-7-24 16:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我有一个20kb长的质粒,准备转293T细胞,不知道这么长的质粒会不会影响转染效率?
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沙发
发表于 2014-7-24 22:30 |只看该作者
一般而言,大片段质粒转染细胞通常会影响其转染效率,不知道你采用的转染方法是什么?我的建议是尽可能提高质粒的纯度,适当提高质粒的量,同时提高一下细胞量,会对转染效果的提高有一定帮助。& x& r, _9 j9 \/ a6 C1 j8 E9 E7 m
希望对你的实验有帮助。
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藤椅
发表于 2014-7-25 13:02 |只看该作者
转染效率会随着质粒长度的增加而大幅度缩减,而20kb长度的质粒转染效率极低,可用电转染方法试一下,或多试几种转染方法。当然如果能减少质粒长度的话则更好。我曾经转过15kb的质粒,几乎没什么荧光。
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板凳
发表于 2014-7-25 13:18 |只看该作者
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' x* F% ^9 @: c+ q# y0 F! d  S2 _, T那如果受体细胞本身就很难被转染(常规质粒转染率低于50%),对于长片段质粒是不是就可以说是无解了?
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