请教老师们一个关于脐带间充质干细胞培养的问题

wuzhongqi

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他剪得组织块太小了，不能直接加培养液，需贴壁2个小时以上，若是组织块较大，可以直接加培养液，不要加太多，不然组织块会漂起来。

zarecol

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a，你所使用的方法是组织块倒置培养法，在分离前要把血污清洗干净，然后选择无管破裂，血有明显渗入组织的部分分离为好，剥离血管的时候，除了两条动脉以外还有一条经脉需要剥离。还有就是你瓶底没有必要用FBS浸润，分离的组织块用配置好的培养液重悬一下就完全可以达到贴壁的效果，重悬后离心弃去培养液贴壁即可。
5 w. w+ R& h( w* `3 Xb，以上是你步骤中的不足之处，另外，DMEM/F12选用1:1的就可以了，一般的培养液都是已经做过无菌处理的，不放心可以用0.22滤网过滤下，有没有这步一般影响不大，不过要求你所用的培养液是新开封的，而且加入的因子必须用0.22的滤网过滤（FBS，和双抗）。# w* n: x' Q: u
c，培养液中一般会加入一定量的L-Glutamine，但是谷氨酰胺在培养液中不稳定会讲解，所以我们养细胞的时候一般会从加，你要是短期培养可以加入Glutamine。培养时间较长可以加入Glutamax。Glutamax半衰期长，相对Glutamine来说在培养基中要稳定的多。希望对你有帮助。
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cloud100

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嗯，好的，谢谢您的指导！

1021618988

放置一天后，加入培养基是不是应该就可以倒过来了。不用再底朝上培养了吧。

洛古16

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" H( N( K& @" Q; _( e5 A是的