人脐带植块培养清洗换液的问题

荷荷

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个人经验，剪碎的华通胶贴壁前多洗几次去除透明质酸更有利于组织块的贴壁和细胞爬出；另外植块贴壁后我们也会选择全量换液，把组织块清洗几遍，这样换液两次之后，你在显微镜下观察就可以看到组织块中的细胞，一般6-8天会有细胞爬出，10天即可传代，详细信息可看我以前发的帖子。祝你好运！

willow0711

回复 荷荷 的帖子' k1 N9 C# l. B2 M( F( ?
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恩，谢谢你

18943340581

回复 luyue6453 的帖子9 X9 O7 z6 T2 s

$ N6 b/ j* y1 t) f! d& o* |3 E- g3 f组织块在剪碎前要加入一点培养基，依据组织块量的多少确定加入培养基的量，不能加太多，加多后组织块不容易贴壁，我们一根脐带只剪出6个皿，剩余的脐带就不要了，这样剪碎前加入0.5-1ml左右的培养基，如果脐带有水肿，要减少加入培养基的量。

luyue6453

回复 单个核细胞 的帖子+ S$ R$ F/ j* `+ K; ?: T7 o

; X9 t, r+ G  k3 M/ G谢谢你了，等我也用这个试试，看看细胞能不能像你养的那样好。我的原代看着就有老化趋势。

luyue6453

回复 18943340581 的帖子9 p* y) S( s- x, y' _$ t

) A* P$ |5 G, b- U说的对哦，我确实越到到水肿的脐带，当时还没认为是水肿，只看着里面像是脓液。

月_幻影

一般剥离前先冲洗干净血液，再去剥离出华通胶剪碎即可，不用再洗了，洗了反而不利于组织块贴壁。细胞爬出的情况一般因个体差异而异。

willow0711

回复 月_幻影 的帖子+ D1 u; p' ^: d2 z3 T& l- K

, D5 Y7 M( \& p+ D哦，谢谢

zhoufan025

回复 单个核细胞 的帖子$ l5 [7 D8 j8 ~- `. ^: ]
3 s% g- a; c1 h( T
你好！这四张图分别是第多少天的？我师姐说贴壁的组织块不用去除，就算传代后它也能继续爬细胞出来，我一般到P3代可以冻存的时候原皿里面都还有一点组织块，冻存时再去掉的。也不清楚一直留着这些组织块到底有没有用

shunanqi

这真是每个地方的习惯都不同，我们的做法是剥离下来的胶不用洗，若洗会增加污染几率。正常培养的话5天一换液，一般换液俩次就长的差不多可以传代了。极少数需要换3次。
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说点题外话，我想加咱们论坛的QQ群，申请了好几次没回音，

单个核细胞

回复 zhoufan025 的帖子
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原代培养的时候可以不着急去组织块，到首次传代时才去除，接种细胞至新的培养皿。若是不去除，组织块有大有小，移液管不能顺利吸取。你可以把去除的组织连同培养液加入到一个新培养瓶，让它继续长细胞。只要细胞长出来了，什么时候去除组织块不是大问题。