脐血干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞和CIK细胞冻存密度

tianangelt

大家好，最近在冻存以上四种细胞，但冻存效果不好。请问大家在冻存以上四种细胞的时候，冻存密度分别是多少呢？谢谢。

tianangelt

我冻存以上细胞都是用的Medium：FBS：DMSO=5:4:1的冻存液，另外都是人源细胞，希望大家不吝赐教

yaolinzhang

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3 ?1 E. q# c4 sDMEM：FBS：DMSO=7:2:1，细胞密度可以为105-106/管

wf78365421

细胞密度可以为105-107/管

tianangelt

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# |4 _8 Y. x# I2 g) P如果达到1*10^8/ml是不是就太高了？

apsuifeng

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FBS比例多会影响冻存效果吗？？ FBS在冻存这些细胞时不是提供养分的吗？？

2420527

主要还是看你的冻存液怎么样吧，一般10%DMSO+培养基，浓度105-107/管应该都可以的。

tianangelt

回复 yaolinzhang 的帖子3 K; p. U0 n# K& W  U6 q7 k

3 Y1 y+ |7 [. }- A这个密度会不会太低了？复苏的时候本来就会丢失一部分细胞，这个密度如果复苏在T75培养瓶的话，需要很多支合并在一起吧？请问您用这个密度冻存的是MNC细胞吗？

tianangelt

回复 apsuifeng 的帖子3 h" t* ^0 }) |
) X4 I1 ^. B8 a+ [. y# [) K
个人感觉应该不会，很多人用的是FBS：DMSO=9:1的冻存液，只是不知道密度太高是不是会影响冻存效果。

tianangelt

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0 X/ C* {. G7 l  j& p, c! f' o+ l4 p% K6 ~8 T" y% `
那您有没有试过比较高的浓度呢？如果达到10^8/ml可以吗？我怎么看有的人说MNC冻存要达到2*10^8呢，没有查到相关的文献报道。