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zhaoping

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楼主

发表于 2013-7-28 15:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

各位大侠，有没有人做神经球单细胞消化后传代的？感觉神经球基本不增殖，每次传代计数细胞越来越少。用Accutase和0.05%胰酶1：1混合消化，胰酶抑制剂终止。请问高手们怎么传代神经干细胞获得较多神经干细胞？

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bj123

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沙发

发表于 2013-7-29 10:28 |只看该作者

我只用accutase即可，效果比较好，用培养基终止、

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jojomayer

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藤椅

发表于 2013-7-29 12:38 |只看该作者

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想问一下楼上，accutase不是在其说明上说不需要终止吗？为什么大家还是普遍在终止它呢？

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zhaoping

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板凳

发表于 2013-7-29 20:46 |只看该作者

回复 bj123 的帖子# g ~1 N. t6 J# D
1 T& b0 M- K2 c
请问bj123 你传代时有没有计数？有没有感觉细胞越来越少？球确实在变大，但计数的话其实细胞数并没有增多。你传了大概几代了？

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bj123

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报纸

发表于 2013-7-30 14:45 |只看该作者

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没有进行计数。5代以上了。

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dingyx2009

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优秀会员金话筒

地板

发表于 2013-8-6 12:14 |只看该作者

用accutase消化就很好。球长太大再消化也不好，由于中央的干细胞缺乏营养而坏死。看着球很大，消化后细胞数量并不多。最好摸索一下增殖几天的干细胞就开始传代。

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小渝

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7楼

发表于 2013-8-20 10:29 |只看该作者

我用的TrypLE，有时也直接机械吹打

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beiwj

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8楼

发表于 2013-8-23 12:14 |只看该作者

我们用分散酶，效果还不错

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