![Rank: 2](static/image/common/star_level2.gif)
- 积分
- 289
- 威望
- 289
- 包包
- 353
|
刘森泉 发表于 2013-5-22 20:50 ![](static/image/common/back.gif)
4 ?( ?; e' u% z6 g* B* M; ^" W$ [回复 cyberpig 的帖子: ?3 Y) H$ Q, ~1 u: @7 v' r
5 X! i2 d2 ]9 K
首先非常感谢你的建议。我主要是pcr-cDNA扩不出来,拿了很多sample试了都不行,这个 ...
+ B0 j0 W V/ Z. a我想可能要查一下關於那基因的review/文獻(例如那基因是否在其他相似的model organism中也表達)。如果那是比較新/很少研究的基因,我想可能需要解剖不同發育程度的胚胎,再做RT﹣PCR,看看能不能擴出來。8 z3 e3 f# w( H# Y' M W8 \5 S
) e( H, f/ O* K" ~" T. C另外我還有一個大膽的想法(不過不知道能不能成功),就是把(現有的)全段基因的dna放進有pCMV的質粒(令該基因在動物細胞不斷表達),轉染細胞,然後再做RT-PCR(理論上即使有內含子,在相同類型的細胞中也會一樣的切掉),最後直接用這個cDNA來做往後的實驗。不過風險就是不知道你這基因究竟是alternative splicing還是普通的splicing.... |
-
总评分: 威望 + 20
包包 + 30
查看全部评分
|