干细胞出现聚集生长的原因

袁小懒

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; k: j  T8 _; r3 O6 e最近换用了DMEM+10%FBS培养脐带间充质干细胞，发现细胞生长缓慢，传代后细胞明显变大，生长慢，无法达到高融合度，同时还发现细胞在皿内生长不均，出现有些部位无细胞生长的光斑，而有些则形成了聚集生长的细胞克隆，干细胞聚集生长是不是标明细胞有分化的倾向或已经分化了？各位高手指点！

小冬子

传代后细胞没有很好的混匀也会出现细胞重叠生长的情况，应该不是分化，这种情况下，将这皿细胞原盘消化原盘传一下，仔细混匀，再生长出来的细胞就很均匀，状态也不错。

袁小懒

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; m, Z5 M! e/ g) [9 I5 z有没有其他可能原因啊？

lic126

个人觉得，还是在接种的时候  没有吹打均匀。导致局部生长密度过高，这一小块  明显就感觉是长过了的感觉。

小冬子

回复 袁小懒 的帖子2 S# L  S7 s4 U* u; \: v+ g% k2 G
1 j7 t; \% p& T, h8 F6 T
如果是原代细胞传代后出现这种情况的话，可能是有细小的组织块残留，从组织块周围爬出细胞

袁小懒

回复 小冬子 的帖子' @( O$ T+ f  }, U# X3 b9 `4 C1 T

: M6 Q- V, K# _有道理！那如果不是组织块呢？

cx4236850

自我经验，你的培养基配置好后怎么保存的，如果放在四度那就不难理解了。。。

lic126

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我们平常培养基配置好后 都是放四度保存啊。需要使用前  会提前放置室温预热。

cx4236850

回复 lic126 的帖子# Q% L+ U6 g- N! |& G- [! b' _) F

6 D+ Z( E4 D9 p3 C我最近比较配置好的培养基放四度和放-20度养细胞的效果，结果发现从-20度拿出来的培养基细胞长的更快，形态更好，四度培养基中包括谷氨酰胺等等重要德干性因子都会部分降解吧，反正这是我的一点经验，具体还看自己。。。

lic126

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( T' C# N; q6 c; g; r8 r; B7 g5 |0 |! |; n  r' |" p/ O
嗯，各有各的配置基质和保存方法啦。学习了。并且我们的培养基用得比较快 一般都不会超过一个月。所以4度保存，能满足我们的常规需求。