- 积分
- 1250
- 威望
- 1250
- 包包
- 219
|
4 j- u: R. b I' X1 y5 c6 p多聚赖氨酸玻片如何处理?
6 m' S8 L6 ~9 s 多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:9 n/ h+ q* z# @ G9 F
' a! M! n$ B1 j- a (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。/ d8 N n7 B% w. ~' H. t$ P+ N
4 n, | ]- x; J9 v- f' V5 {& m
(2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
& }$ v0 E- q |. E' C- x( u
- [. b' ^5 Q- w0 E' D- a7 F3 A (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
* A. N( [4 Y( N: I
; r1 D6 P7 e. Z. ` (4)取出后放在无尘的地方晾干。
$ ^1 I& ~: @' r; X
) G8 y% e+ f6 C9 K" y% g5 V (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
( M; [' H; V$ m3 I" F. C& O8 r# r: X1 S7 ?
(6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。
" T6 P* T8 d9 e/ ]* j2 a2 B6 r# H
" ~+ w# i1 p: ]& I. w1 M: J (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。% ^* k9 ?) J$ |0 E1 g8 b( ^; i" u# C
$ K x5 w/ V& E4 @. T
# @# w# i6 G4 ? B# G
! Y* x# z0 T" I
固定的原理:* f/ P# H- ^( Y# `! I. v- g7 {
- x+ f z0 d) I
细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。 |
-
总评分: 威望 + 2
包包 + 10
查看全部评分
|