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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑
% k" ^/ |% c- e! a; o$ r  F% O3 r9 [9 g$ _" c
请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者

4 j- u: R. b  I' X1 y5 c6 p多聚赖氨酸玻片如何处理?
6 m' S8 L6 ~9 s          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:9 n/ h+ q* z# @  G9 F

' a! M! n$ B1 j- a        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。/ d8 N  n7 B% w. ~' H. t$ P+ N
4 n, |  ]- x; J9 v- f' V5 {& m
        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
& }$ v0 E- q  |. E' C- x( u
- [. b' ^5 Q- w0 E' D- a7 F3 A        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
* A. N( [4 Y( N: I
; r1 D6 P7 e. Z. `        (4)取出后放在无尘的地方晾干。
$ ^1 I& ~: @' r; X
) G8 y% e+ f6 C9 K" y% g5 V        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
( M; [' H; V$ m3 I" F. C& O8 r# r: X1 S7 ?
        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。
" T6 P* T8 d9 e/ ]* j2 a2 B6 r# H
" ~+ w# i1 p: ]& I. w1 M: J        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。% ^* k9 ?) J$ |0 E1 g8 b( ^; i" u# C
$ K  x5 w/ V& E4 @. T
# @# w# i6 G4 ?  B# G
! Y* x# z0 T" I
        固定的原理:* f/ P# H- ^( Y# `! I. v- g7 {
- x+ f  z0 d) I
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
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wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑
2 u& w0 A- ~6 H5 s1 P) S" Y! ]% X; Q' L2 k, g( [& ~# F
回复 wf78365421 的帖子5 p' X, N2 a" R+ t8 H

% R) Y! L! x% H7 |谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子. E) H4 f1 [/ z8 C. u3 V+ {

5 F: D5 L: c7 Y你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样; q" B9 T/ Y' Q7 x

" C' Q1 d9 I7 u7 C4 X否则他会看不到

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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