完全培养基养spheres

leiwang

有一天手贱，把养了5天的sphere培养基（DMEM-F12 + EGF + FGF + BSA）换成了完全培养基（DMEM + 10% FBS），发现sphere没有什么变化，长势良好，也没有贴壁。是不是说低粘附板在shere形成和维持过程中更重要呢。元芳，你怎么看？

希望之光

对你研究的sphere不是很懂，但可以肯定的是用低粘附板或皿 对培养球状的细胞团是很重要的

617507911

其实关于有血清培养瘤球早在80年代的时候探究的比较多，那时候基本上用琼脂铺在孔板中就能养成瘤球，本人也在这个方面做过一些尝试，不过由于用有血清培养的瘤球外面似有一层蛋白膜，影响药物进出。其实我至今也不明白为什么筛选肿瘤干细胞一定要用超低吸附孔板，难道用无血清养出来平铺在孔板或培养瓶下的就不含有肿瘤干细胞？

leiwang

原来总觉得培养基对sphere形成更重要一些，觉得血清成分有可能诱导sphere cells分化掉。现在看来低粘附板更重要一些，是否分化的cells不能适应悬浮条件，增殖缓慢或者停止，或者死掉。而干样细胞可以存活，甚至增殖，最终导致sphere形成。并且使得干样细胞富集。

加贝

我没有试过低粘附的板子，我的细胞只在无血清情况下能形成sphere，加了血清就贴壁生长了，看来可以订一些低粘附的板子，想问下您的板子是什么牌子的

daviddow

我的也是在着了血清就附壁了

kouyokuzen

请问你的sphere培养基（DMEM-F12 ）是哪个公司的？

leiwang

板子是Costa的低粘附板，我用的6 well plate。培养基是gibico的DMEM/F12（1：1）。

细胞海洋

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细胞海洋

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