为什么要对质粒进行酶切检测？

yuhaoze

为什么提取出来质粒要进行单酶切、双酶切？大肠杆菌培养时间长了质粒大小会变化吗？

w343989328

会发生重组，看酶切图谱只是大概地检查一下

yuhaoze

回复 w343989328 的帖子7 J9 [9 r) h: V# S
6 f) R: ^; T0 f4 d+ Q, D
我想看看这种重组的资料，您那里有吗？

军医

有时候要的时间长了，这种重组发生的概率不大吧，平时多摇一会好像对结果影响不大。

lazyworm

酶切只是初步的验证，酶切发现大小一致的话，就要测序了，测序结果对的话就成功了。

daviddow

酶切证明啊

weiyepan

回复 yuhaoze 的帖子
* I& ?) X9 `4 y, S9 x
  C& ~/ I+ W0 k2 a& E, z& }: d% Y额，现在摇质粒用的一般都是DH5a来源的host，重组的基因都被敲除了，例如RecA等。: x6 \, ?! h, |7 B
质粒变短倒是有可能，一般发生在大质粒上比较多（10K以上）。
" P. I: d. h8 t) |% ]$ k! y) T1 Q酶切鉴定只是确定你的菌种没有污染而已，一般不会有什么问题。

yuhaoze

回复 weiyepan 的帖子8 e9 I3 G1 J+ A

8 [5 h5 q2 m. o6 P0 J; k/ v谢谢！

huangcong1988

我们一般做双酶切，单酶切不做，做单酶切意义不是很大。做完酶切之后还要测序，酶切只是初步鉴定，测序对了才行

flybear

酶切可以确定其位点没有突变！！！这个很重要，有些是转进去了，但是可能没有整合进去，也可能是整合进去了，但是发生了突变！！！