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看了一些讨论,有点明白了
4 S$ w9 H4 Z% l6 z0 n9 W1.用分化的还是未分化的细胞做实验要看实验要求,好像做药物筛选用未分化的,因为分化后的细胞对药物更敏感。/ }5 B1 N5 C+ A/ c+ L3 h6 H v
2.但又有疑问了,如果我做神经元相关的实验是不是一定要做分化的呢,还是没有答案
/ b- t, k( c& O3.国内的PC12有未分化、低分化和高分化之分,但是ATCC貌似只有未分化细胞,国外文章中做PC12分化一般用NGF诱导,Greene LA , Tischler AS . Establishment of a noradrenergic clonal line of rat adrenal pheochromocytoma cells which respond to nerve growth factor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 73: 2424-2428, 1976. PubMed: 1065897 文章里讲NGF诱导时的PC12没有增殖能力,但会一直分化,停止诱导后分化停止,增殖开始继续。这与国内的高分化PC12细胞株有增殖能力且不弱的说法不一致,而且国内高分化PC12的来源似乎有点不明确,细胞形态也与NGF诱导的细胞不一样。
4 _7 C, t: o8 \: k [. W( i$ r
4 @. O9 W, G* E. K9 k' X所以又有了新的疑问5 J# k1 ]/ x& y5 R# B8 ?% r4 E
a 用国内的高分化PC12细胞株做实验能被杂志认可吗?+ I! i& g" S/ n/ t8 K) F4 i
b如果不用高分化细胞,因为要做转染,是否必需保证细胞增殖能力呢?如果一定要用有增殖能力且NGF诱导分化神经元的PC12细胞做的话,可以这样设计么:先加NGF诱导至突触形成,停止诱导,恢复增殖,再开始转染? |
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