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楼主: 759512199	go [请教] 如何把小块组织消化成单细胞？ [复制链接]

Robert-A

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21楼

发表于 2012-12-22 15:35 |只看该作者

不同组织来源的细胞应用的目的决定你的方法学

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hbs08230

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22楼

发表于 2013-6-19 13:28 |只看该作者

如果是各大脏器的话，可以考虑用留置针做perfusion。先灌注Heparin，然后缓冲液，然后0.025%（w/v)collagenase typeIV/II，然后缓冲液。摘下脏器放在culture dish里用1ml的枪头撕开，就能看到分来的细胞流出。

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lizzy_81

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23楼

发表于 2013-6-19 14:02 |只看该作者

什么组织啊，不同组织处理方法不一样。组织可以组织块贴壁，剪碎，胶原酶消化，还有用组织处理器的。

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漂泊的风

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24楼

发表于 2013-6-25 16:03 |只看该作者

胶原酶好，胰酶作用力太强了，细胞容易消化过度，降低细胞的活力。

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ccnuld

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25楼

发表于 2013-6-26 11:00 |只看该作者

一般胰酶用的少，多用胶原酶，另外胶原酶可以联合其他的酶使用以得到最好的解离效果，比如透明质酸酶可以增加结缔组织细胞间基质的解离，离散酶可以促进成纤维细胞的解离。胶原酶IV工作浓度50~100U，时间不等，示组织类型而定。

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yehaizi

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26楼

发表于 2013-6-26 12:45 |只看该作者

我们实验室就直接用的0.25%的胰酶，然后消化15分钟就可以了，这个消化时间还是得依照具体的组织以及剪得组织块儿的大小而定的

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xld1984

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小小研究员热心会员帅哥研究员

27楼

发表于 2013-6-26 14:04 |只看该作者

一般原代组织块用胶原酶消化的较好，传代时一般用胰酶。看看你分离细胞的部位，选择用消化法还是种植法

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