如何把小块组织消化成单细胞？

yinfuhua

胶原酶（尤其是Ⅳ型）对组织损伤较小，消化效果较好。胰酶对细胞的损伤与胰酶的浓度及作用时间有关。

祁门红茶

我消化的神经组织，是胰酶和胶原酶联合使用的，胰酶0.25%，胶原酶0.1%。当然，酶的使用与组织类型有很大关系，间质组织多的组织用胶原酶和胰酶合用会加快消化时间。个人不主张植块法，细胞爬出速度慢，爬出来的细胞成堆生长，各组织块细胞生长速度不一，而且不是所有组织块都会爬出细胞，观察起来也不好看。

祁门红茶

我消化的神经组织，是胰酶和胶原酶联合使用的，胰酶0.25%，胶原酶0.1%。当然，酶的使用与组织类型有很大关系，间质组织多的组织用胶原酶和胰酶合用会加快消化时间。个人不主张植块法，细胞爬出速度慢，爬出来的细胞成堆生长，各组织块细胞生长速度不一，而且不是所有组织块都会爬出细胞，观察起来也不好看。

wuzhoulingxiao

如果你做的是MEF细胞培养，那最好用胰酶、0.25%不含EDTA，将组织切碎，37度消化10min，吹打均匀即可培养；如果做肿瘤组织，可以用0.25%含EDTA先消化5min，再用4g/ml的胶原酶消化1h，每隔10min摇匀一次，当然也可以用组织块贴壁培养法，那得看你是否担心成纤维细胞污染，怕污染要注意增加晾干时间。

荣荣荣

或者剪成小块用胰酶消化，取上清中的细胞，或者剪碎等细胞爬片，细胞也很多，或者胰酶消化之后加血清终止再将组织块和上清一起培养，既有消化的细胞又有爬出来的细胞。

Donnies

我们实验室之前有人做从动物中提取组织，然后分离细胞的，就是先用剪刀剪碎，然后用胶原酶I消化，然后培养

shy8610

同意还是胶原酶，原代非常容易污染，还需要用高浓度抗生素反复洗涤，胰酶的杀伤比较强，我们细胞系一般都是很少量很迅速的使用。

lousia04306

一般的话用胶原酶消化20分钟，然后会过滤组织块，再离心这样得到的细胞会多点，仅供参考啊

nydfy

组织消化一般都用胶原酶，如果变粘稠可以加入DNA酶1，不同的胶原酶针对不同来源的组织，你可以查一下，如gibco and roche!

静夜的单簧管

原代主要分为两种方法，一种是组织块培养法，一种是消化培养法，我认为后者消化的效率更高，此外用我个人认为用胶原酶进行消化培养效果更好，同时还应该根据不同的组织学类型选择合适的胶原酶类型（分I、II、III、IV型）。
- t# T0 M0 P' F8 r3 J; i7 @如果肿瘤组织原代提取因为组织较疏松，可消化时间短一些，而一些较致密组织的原代培养则需消化时间更长，此外要原代培养要消化效率高关键还在于要将组织剪碎，越碎越好。抗生素的应用也很重要。