求教肝癌细胞Hep 3B的培养

runsong

本人在协和细胞中心买了一瓶Hep 3B，用协和细胞中心给的培养液培养效果很好，但换了我自配的培养液后细胞状态急转直下，细胞内出现很多黑颗粒，细胞也变得干枯起来，虽然生长速度还可以。, X) c" Q# H& w" I
培养液的配方我是用的协和细胞中心推荐的MEM(Gibco,11095-080 ,我买得是液体的，使用期至2013年五月 )，加了10%胎牛血清（四季青）。- D) T0 e6 ]! r6 O' [& U2 j' J6 Z# e0 _
血清没啥问题，用它养hela、hep g2等4种细胞都问题不大。
  C" m% y! Q9 A/ q$ Z$ R! f: p协和细胞中心拒绝透露他们用的基础液的来源与血清来源，只说加点hepes试试。* x: d- j' L1 B1 n
我该怎么办，各位前辈们。

jinzi1984

Hep3B 我一直用DMEM+10%FBS...活的很好... 养了2年

linzi214

会不会是支原体感染？我们在复旦大学中山附属医院买的细胞，也是支原体感染比较严重，抗支处理后细胞状态比较好。另外用国产的血清会不会有问题？HeLa细胞和HepG2细胞增殖比较快，所以你会感觉血清的影响不大

Donnies

你用一下Gibcol的DMEM+胎牛血清看看如何

goohongzi

这个细胞我也能看到颗粒感， 但是除了颗粒感外，没有任何症状，所以我个人把它归结为HBV病毒颗粒，哈哈哈。细胞换培养液需要适应一段时间，然后估计就好了。我用Gibco的DMEM + 10%的FBS

minshuyin

超哥 我建议你用进口血清尝试一下