关于间充质干细胞软骨诱导几个问题的请教

86964109

! b! q7 t# o' u7 M& T6 G5 R. m
; [' s# S5 q1 g4 c$ D请教高手：在干细胞进行软骨诱导的过程中，
9 q  `+ S- i' d$ ^( J6 S1.下述诱导液成分中哪些是必不可少的，哪些是可以省略的？他们都各起到什么作用呢？（成软骨诱导液：DMEM培养基中加胰岛素6．25 μg／ml、转铁蛋白6.25: E/ j1 D* a: p2 z- s4 m2 c- h& S9 Y
μg／ml、亚硒酸6.25 μg／ml、亚油酸5.35 μg／ml、牛血清蛋白1．25 μg／ml、丙酮酸# ~$ V* C. x! M8 H+ w( c
盐1 mmol/L、抗坏血酸-2-磷酸盐37.5 μg／ml、地塞米松10-7 mol／L、TGF-β1
. j8 w, D, f* j8 K: P! x( d10 ng／ml）。
/ `- H' v# N$ ^3 @另外，如果只加入DMEM高糖， 50mg/ml维生素C，地塞米松10-7 mol／L，不加别的因子，有可能诱导成软骨细胞吗？  
' P3 ?) Q+ ?0 W+ J2.鉴定诱导是否成功阿利辛兰染色和甲苯胺蓝染色哪种比较好？4 i$ ^* [% J1 L
3.一定要制成细胞团再诱导吗？
/ W$ p9 `7 [, s; @; |
) X) u2 A& e* P" [# X# x多谢指教啦！

sarah19860420

回复 86964109 的帖子3 Z8 f" r; X# N
! `+ I2 Q* Y+ ~& _) P
您提的问题，你了解答案了吗，同问？

fuyinsheng

前面诱导分化的配方不太了解，根据我的经验回答下后面两个问题吧，我们是用阿利新蓝做的染色效果还是不错的。MSC分化软骨的时候不用特意制成细胞团吧，调整好接种密度，分化过程中MSC会逐渐扩增的，分化成软骨细胞后自然就能成团吧。

ytumuyangren

    间充质干细胞诱导成软骨是三系诱导中最不好诱导的，如楼主所列举的试剂，我们都用到了，而且缺少一种因子诱导都比较困难。胰岛素-硒-转铁蛋白等可以买现成混合剂-ITS，这个相对比较好点，自己配制差别比较大，更不宜成功。现在市面上有出售专门的间充质干细胞成软骨诱导液，可以按照说明来具体操作，只要提前的间充质干细胞没问题，应该能成功。
& ]" b1 [8 H2 G' e% E, ]    不做细胞团块也可以诱导，将细胞接种至培养板中，一定密度后添加诱导液，之后用阿尔新兰染色，这个效果比甲苯胺蓝染色比较好，后者用来做组织学染色较好。
' U; P* j# H1 \9 e; G  b9 k    做团块诱导就是pellet诱导，这个只要能诱导成功就可以看到随着诱导时间的延长，pellet就会逐渐变大。祝楼主实验顺利！

heather_lu

GIBCO的成软骨诱导很好用，推荐

86964109

ytumuyangren 发表于 2014-9-30 13:06
6 R- ?' z, B& H' w* E! `间充质干细胞诱导成软骨是三系诱导中最不好诱导的，如楼主所列举的试剂，我们都用到了，而且缺少一种因 ...

6 r3 _5 Q0 N" U0 E$ W' A5 A4 X
谢谢解答 虽然查到了一些知识 而且已经不做这方面的工作了 还是很感谢您的解惑。

86964109

heather_lu 发表于 2014-10-5 09:25
4 O" Z$ C0 x/ ]$ U: V+ iGIBCO的成软骨诱导很好用，推荐

$ P' K8 i* @3 @2 p$ k谢谢你的经验分享

genetics2004

有心人啊，平时自己只做不想，感觉用GIBCO的分化试剂还是很顺的

丨叶落知秋丨

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1 @5 o, u5 x& ?GIBCO的成软骨诱导培养基可以培养兔子和大鼠吗？大概多少钱？