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关于matrigel的问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-24 09:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我铺的matrigel是1:20稀释的,铺完之后在镜下观察,会看到很多纤维还有类似杂质的黑色斑点,请问各位战友有否遇到相同情况。事先说明一下,溶胶、配置等过程完全按照操作手册,冰上操作,所有耗材预冷。
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-10-24 11:02 |只看该作者
应该没有
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藤椅
发表于 2012-10-24 15:19 |只看该作者
偶尔看到黑色斑点,但是不影响细胞贴壁生长。
+ O7 w' }5 I. f/ Q& r' t; O6 Q0 J
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板凳
发表于 2012-10-24 16:07 |只看该作者
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不知道你说的是不是类似于纤维样的物质,matrigel铺完后会有一层薄纱样的物质包被在板子表面上,比较均匀,操作不当会形成大块的胶聚集物,肉眼都可见。如果你都是按说明书来的话,应该是正常现象。
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报纸
发表于 2012-10-25 15:48 |只看该作者
这是很正常的,我的也是这样,hESC在长得没有任何问题。
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地板
发表于 2012-10-25 20:32 |只看该作者
回复 chentian820 的帖子9 m" X) E' f6 p
) E2 _" I9 N. z/ G
我直接把hESC复苏在上面,用的是mTeSR1,干细胞复苏48h后基本没怎么贴啊。
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发表于 2012-10-25 20:33 |只看该作者
回复 shuishan 的帖子
$ K  j6 X% U" V/ o6 p
5 V/ v% c( O1 t  `feeder cell复苏在上面感觉有点皱缩,不知道是不是有影响。
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发表于 2012-10-25 20:35 |只看该作者
再问个问题。matrigel最多可以多少比例稀释?1:50?

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发表于 2012-10-27 07:38 |只看该作者
回复 bubble_w 的帖子/ D' `) [+ t. k, M( v4 m
! P% u) Z9 U. i( f! P) Q5 F
我们养hiPS细胞,matrigel1:80稀释,细胞贴壁和生长都没有问题。
' _# i4 F( D& I8 W4 g; v3 @: i+ x稀释Matrigel胶的时候,除了按操作手册操作以外,还要注意速度要快。
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发表于 2012-10-27 14:37 |只看该作者
回复 bubble_w 的帖子" {: R' z) ^3 \" Z4 X3 ~2 z( w8 i
6 e7 V: u  P2 K# P
你的干细胞种子不好,一般复苏效率在10%左右。可能你的就没活的种子
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