从脐带血和人外周血中分离的单核细胞，淋巴细胞比例？

jihaijie

一直想搞明白从脐带血和人外周血中分离的单核细胞中，淋巴细胞包括T、B及NK占单核细胞的比例？这个用什么检测方法能得出数据？有大虾知道给正解一下。

lousia04306

这个是需要通过流式细胞仪检测的，根据淋巴细胞膜上CD分子表达的不同，流式细胞仪可以分辨出淋巴细胞及其各种不同的亚群，利用计算机软件计算出淋巴细胞亚群的百分数。
/ k. s4 o2 J# B+ N- f+ E淋巴细胞表面抗原分布如下：T淋巴细胞：CD3+；B淋巴细胞：CD5+，CDl9+；辅助性T淋巴细胞：CD3+CD4+；抑制性T淋巴细胞：CD3+CD8+；NK细胞：CD3-CDl6+56+等。
9 d* D/ x& |) ^. U6 [所占比例的医院参考值：0 }$ Z1 v4 t1 s% G2 z. U
检测项目                     参考值（百分比）9 i! E$ l$ m! w) X/ P( j) Z1 [
CD3+T淋巴细胞         64.62~77.08%
% \  i9 n  P# F5 |. |; Y" e) nCD3+CD8+T淋巴细胞    24.81~35.99%
+ [, K' y- C% A. R: w, r% \CD3+CD4+T淋巴细胞    32.69~44.23%# L  P4 m4 a+ E: V/ T( p
NK细胞                  14.47-30.27%. i  s' Z+ \( w' k, g9 q0 v9 ?5 e
B 细胞                  6.38~12.46%/ u  c- ]- p; j' K  A, }9 _. c
CD4/ CD8比值           1.04~1.72%       

jihaijie

我想知道绝对比值。非淋巴细胞的单核细胞用什么标记啊？

lousia04306

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" @& I. A+ H, n+ H' P4 k) x
7 H$ Y4 s: O# @0 C  y( y# E9 T: @! K下面结果是调查的一个地区的计数结果，各地区人有所差异，给你参考
! f8 Z1 w$ ?* D# m5 a- B7 ZCD4 正常平均值为865.77 ±304.54; CD8 及CD4 /CD8 在不同性别之间及
: s4 m1 w" \+ r& O) T$ b0 D部分年龄组之间差异有统计学意义, CD8 计数平均值为674.28±273.63, CD4 /CD8 平均值为1.38±0.51。
5 Y4 F9 y; u& u! T非淋巴细胞的单核细胞是没法标记的，那些是用五分类的血液分析仪检测进行计数的。

jihaijie

我的意思是现在脐带血造血干细胞保存的形式是分离单核细胞，那么这个单核细胞群体中的淋巴细胞比例如何？

jihaijie

自己定下。高人指导！！！

jihaijie

在从人外周血分离单核细胞或从脐血分离单核细胞后进行CIK细胞诱导的实验中，进行淋巴细胞比例的测定，我想有一定意义。应该和细胞扩增的倍数直接相关。

jihaijie

通过查阅资料，我明白分离的单个核细胞采用血细胞计数仪器分为淋巴细胞和单核细胞，不含或含少量粒细胞。采用FACS分析包括大部分CD45阳性和少量CD34阳性细胞.研究发现脐带血还含有CD45阴性的非成熟红细胞。我想对这群mononuclear cells 要充分研究，这对其作为starting material 进行CIK 或其他研究有很大帮助。